一种提取葡萄叶钙黄绿素的方法

背景技术

钙黄绿素，外文名：Calcein，分子式：C₃₀H₂₆N₂O₁₃，分子量：622.55，CAS登录号：1461-15-0，外观为橙色结晶性粉末，有金属光泽。溶于乙醇和碱，微溶于水。其钠盐为橙红色结晶，溶于水后呈现黄色而有绿色荧光，不溶于无水乙醇及乙醚。钙黄绿素分子中含有多个梭基，在不同pH下，电离度不同，将以不同的形态存在于溶液中。熔点大于300℃。钙黄绿素在化工方面的应用很广泛，可以作为络合指示剂，荧光指示剂，主要用于络合滴定钙，也可用于测定锶、钡、铜、锰、钴、镍、钼、铬等。

葡萄叶的生长在雨季尤为繁茂，每个周都要给葡萄去除多余的枝丫，以促使果实的进一步增长，然而被去除的枝丫含有丰富的叶绿素等成分。因为葡萄叶会随着生长而变黄脱离，其中含有较为丰富的叶黄素，通过加入钙离子，充分利用其中所含有的色素，探索如何从葡萄叶中提取钙黄绿素，成为目前所要解决的技术问题。

制备方法

(1)将葡萄叶1kg清洗干净，在烘箱中将温度设置为40℃，烘烤时间为7min，在液态氮的作用下，粉碎至粒度大小为1.0毫米；

(2)向上述滤液中加入质量浓度为25~35%的苛性钠水溶液，调节PH=7~9，升高温度45~50℃，搅拌35~45分钟；

(3)用30%的甲醇溶液在50℃下浸提8~10小时，浸提2次，用离心机萃取叶绿素；

(4)向上述萃取液中加入质量浓度20~25%的氯化钙水溶液，搅拌加热至44~55℃，反应1~1.5h，用盐酸调节pH=2~3；

(5)减压过滤，然后控制温度为50~60℃，浓缩回收有机溶剂；

(6)向上述浓缩液中加入质量浓度为25~35%的苛性钠水溶液，调节pH=9~11，成盐，过滤即可得到钙黄绿素。

参考文献

[1]青岛鹏远康华天然产物有限公司. 一种提取葡萄叶钙黄绿素的方法:CN201310670609.5[P]. 2015-06-17.