新绿原酸的制备方法

背景技术

金银花为忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb的干燥花蕾或初开的花，是常用的中药材之一。首载于《名医别录》，本品味甘、性寒，归肺、心、胃经，具有清热解毒、疏散风热之功效，是一种“药食同源”的绿色天然植物。金银花的化学成分主要有挥发油、环烯醚萜类、黄酮类、三萜及三萜皂苷类、有机酸类、无机元素及其他类成分。新绿原酸是金银花中的主要有机酸类成分之一，具有抗菌解热、抗血栓、体外抗结核活性、抗氧化、抗炎、抑制血小板聚集及对心血管疾病的作用等药理作用，在医药领域具有很好的应用前景。

目前，文献中没有关于新绿原酸的规模制备方法,有文献报道通过多次的高效制备液相分离从金银花中得到新绿原酸20.7mg；在忍冬叶提取物正丁醇部位通过MCI填料进行多次富集,再经过Sephadex LH-20凝胶色谱进一步分离，最后运用制备型高效液相从金银花中分离得到新绿原酸32mg；在肿节风提取物中通过运用反复硅胶柱层析及Sephadex LH-20 凝胶色谱分离，再利用制备液相分离纯化得到新绿原酸5mg；在山牡荆树干心中通过运用反复硅胶、Sephadex LH-20凝胶色谱及反相C₁₈分离得到新绿原酸5mg。这些都是在实验室条件下利用反复常压硅胶柱、凝胶及半制备液相对新绿原酸进行分离纯化；另外，因其制备的新绿原酸的量都是毫克级，所以，其工序过程很难具备放大生产的可能性，即使可以获得克级的样品，也会因工序繁琐、制备时间长、消耗有机溶剂多而增加其生产成本。

因此，为了更好的开发利用新绿原酸，在现有技术的基础之上，研究开发一种制备效率高，速度快，生产成本低，无需使用大量的有机溶剂，从金银花中快速进行新绿原酸的制备方法具有重要的现实意义。

制备方法

步骤a：将金银花药材，按料液比1g：10~30mL加入浓度为50%~95%乙醇作为提取剂，加热回流提取两次(2h/次)，过滤，取上清液浓缩干燥，获得富含新绿原酸的金银花乙醇浸膏(相对于金银花药材，转移率为90.5~95.6%)；

步骤b：将上述金银花乙醇浸膏充分分散于蒸馏水中，按料液比1g：10~20mL，上大孔树脂柱，先用水洗脱，再用10~95%的乙醇梯度洗脱。收集含有新绿原酸粗品的水洗脱部位，流速2~4BV/h，洗脱5~10BV。浓缩、干燥，获得新绿原酸粗品(纯度为30.6~38.9%)；

步骤c：取上述新绿原酸粗品，用中低压制备液相分离纯化，流动相为0.5%甲酸水溶液和乙腈，梯度洗脱，快速纯化，获得新绿原酸单体(纯度为98.0~99.0%)。

参考文献

[1] 江苏康缘药业股份有限公司. 一种新绿原酸的制备方法:CN201510498084.0[P]. 2015-11-18.