羧甲基羟胺半盐酸盐在人工抗原制备中的应用

研究背景

羧甲基羟胺半盐酸盐，英文名是Carboxymethoxylamine hemihydrochloride，是一种神经药理试剂。它是γ-氨基丁酸(GABA)转氨酶的抑制剂，能提高内源性GABA的水平，广泛用于神经药理的研究。近年来在亲和层析系统中，带有酮基，特别是类固醇酮基的配位体，能先与羧甲基羟胺半盐酸盐反应而固定[1]。该种化学物质的化学式为2(C₂H₅NO₃)HCl，分子量为218.59，可以羟胺盐酸盐和氯乙酸为主要原料合成[2]。

应用领域

1）羧甲基羟胺半盐酸盐是应用于切花保鲜的植物生长调节剂，该工艺具有工业化可行性[2]。

2）羧甲基羟胺半盐酸盐可用于制备人工抗原。首先黄曲霉毒素B1通过与羧甲基羟胺半盐酸盐作用，使其形成具有活性基团的黄曲霉毒素B1肟化物，然后通过碳二亚胺合成法制备黄曲霉毒素B1与载体蛋白的人工抗原偶联物，黄曲霉毒素B1肟化物与载体蛋白进行共价偶联，最后产物通过透析，冷冻干燥得到黄曲霉毒素B1人工偶联抗原。相关的反应条件温并且简单可行，偶联耗时短，成本低，容易规模化生产和推广应用；合成产物稳定性好，偶联比适宜，长期保存不易降解；合成产物具备较好的免疫原性，可制备特异性识别黄曲霉毒素B1的单克隆或多克隆抗体，对于建立黄曲霉毒素B1相关免疫学检测方法具有重要意义[3-4]。

3）玉米赤霉烯酮是由镰刀菌属真菌产生的真菌毒素，主要污染玉米，大麦，小麦，燕麦和高粱等作物。玉米赤霉烯酮除具有很强雌激素样作用可产生生殖毒性外，还具有免疫毒性，肝毒性，遗传毒性，潜在致癌性。该毒素可通过污染了玉米赤霉烯酮的谷物及其制品或者残留有玉米赤霉烯酮的肉，奶等进入动物和人体内，给畜牧业和人类健康造成威胁。 对玉米赤霉烯酮进行及时准确的检测是预防和控制其危害的有效手段。我国《GB13078.2-2006饲料卫生标准-饲料中赭曲霉毒素A和玉米赤霉烯酮的允许量》要求，配合饲料，玉米中的玉米赤霉烯酮允许量为500μg/kg。2011年出台的《GB2761-2011食品中真菌毒素限量》中规定了谷物及其制品中玉米赤霉烯酮限量为60μg/kg。用玉米赤霉烯酮与羧甲基羟胺半盐酸盐在吡啶中反应生成玉米赤霉烯酮肟(ZEN-CMO)，用紫外连续波谱扫描法对其进行鉴定，同时计算肟化率；用活性酯法将ZEN-CMO与牛血清白蛋白偶联合成免疫抗原，经过后续实验证明以上通过基因工程技术获得的偶联物质可以进行可溶性表达，且可溶性表达产物对玉米赤霉烯酮具有特异性[5]。

参考文献

[1]白天瑜,黄克新.药理试剂羧甲基羟胺半盐酸盐的合成[J].化学试剂, 1986(05):63-64.DOI:CNKI:SUN:HXSJ.0.1986-05-017.

[2]孔繁蕾,胡兴华,钱涛,等.植物生长调节剂羧甲基羟胺半盐酸盐的合成[J].农药, 2001, 40(9):1.DOI:10.3969/j.issn.1006-0413.2001.09.005.

[3]蔡敏,周常义,李健,等.黄曲霉毒素B_1人工抗原的制备及鉴定[J].湖南农业科学, 2013(12):10-13.

[4]方维焕,章先,李肖梁,等.黄曲霉毒素B1-载体蛋白人工偶联抗原的合成方法:CN201510400707.6[P].

[5]王玉燕.玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及噬菌体单链抗体的筛选[D].南京农业大学[2023-09-30].DOI:CNKI:CDMD:2.1014.216593.