鲨单克隆抗体制备服务

背景^[1-7]

鲨单克隆抗体制备服务结合噬菌体展示技术平台最先建立了鲨鱼抗体生产平台，通过免疫鲨鱼，可以获得高亲和力和特异性的鲨鱼抗体。护士鲨（Ginglymostoma cirratum）、斑纹须鲨（Orectolobus maculatus）、银鲛、鳐等软骨鱼中发现了无轻链或其他蛋白分子伴随的类似于HCAb的新的或护士鲨抗原受体（new or nurse shark antigen receptor，NAR）。由于NAR分子与Ig亚型在跨膜和分泌方式等几个功能特征方面近似，因此也称为免疫球蛋白新抗原受体（Ig new antigen receptor，IgNAR）。

软骨鱼的IgNAR蛋白是一种二聚体，每条链由1个可变区（VNAR）和5个恒定区（CNAR）构成。没有L链或其他任何蛋白伴随此二聚体。电镜显示IgNAR的V区不同于传统的Ig和TCR，不形成二聚体，而是相当独立的柔性区。利用基因工程技术可将IgNAR的抗原结合柔性可变区表达成独立的可溶性蛋白，称为鲨鱼单域抗体。鲨鱼的血液里存在着350mM的尿素,，这造成了所有鲨鱼血液里的蛋白天生具有很强的稳定性。

软骨鱼类，在进化的角度是拥有“现代”人的适应性免疫系统和免疫球蛋白的最古老的物种。鲨鱼作为软骨鱼类的代表，已经存在有5亿多年。因为生活在海洋，鲨鱼血液中含有大量的尿素防止鲨鱼脱水，同时这也使得鲨鱼抗体比其他脊椎动物的抗体更加强健。与其他动物的免疫球蛋白相比，鲨鱼只产生IgM，IgW和IgNAR（新型免疫球蛋白抗原受体）。

IgNAR是重链同型二聚体，每个重链有5个恒定区和一个可变区。相关研究表明，与其他物种抗体重链相比，IgNAR二硫键的位置有所不同，并且CDR3多一环，没有FR2-CDR2片段，因此IgNAR分子量稍小。这些不同使IgNAR拥有卓越的稳定性和渗透性，并使IgNAR在极端环境下仍然具有功能。

与此同时，这使VNAR对于在抗原表面但是普通的抗体片段不易识别（如：沟槽，裂缝或者埋藏起来的）抗原表位更易识别，同时也更容易渗透到实体组织，比如肿瘤。VNAR也是构建单域抗体非常好的来源，在很多科研和药物研究中都发挥着重要的作用。

应用^[8]

鲨单克隆抗体制备服务可用于鲨单克隆抗体天然小分子抗体研究：

鲨单克隆抗体与传统意义上的由两条重链和两条轻链组成的单体抗体不同,天然小分子抗体是指在自然界中存在的一些奇特的小分子抗体,它们分子量比较小,有的仅由重链组成,有的仅由轻链组成。在骆驼体内发现的仅由重链组成的抗体可以发挥正常的生物学功能,克隆其可变区即获得具有抗原结合能力的纳米抗体(Nanobody)。鲨鱼体内也存在一种由重链同源二聚体组成的非典型抗体IgNAR。另外,在人体内也存在游离的轻链抗体(FLC),在疾病的发生诊断中具有重要意义。

参考文献

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