CCK8细胞增殖与毒性检测试剂的应用

背景及概述^[1]

CCK-8法使用方便，省去了洗涤细胞，并且检测快速，灵敏度高，重复性优于MTr法，对细胞毒性小。CellCountingKit-8（CCK-8试剂盒）是由日本同仁化学研究所（Dojindo）开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒，为MTT法的替代方法，试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-WST-8，在日本，美国，欧洲等国家地区均持有专利，同仁化学研究所于2006年在中国获得了WST-8的注册商标。

产品特点^[1]

CCK-8法与普通的MTT法相比，具有显著特点：

★灵敏度高，数据可靠，重现性好

★操作简便，省时省力

★水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞

★无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低

★为1瓶溶液，毋需预制，即开即用

★适合于高通量药物筛选

应用^[1]

可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。

CCK-8试剂盒在国内知名科研院所、重点大学、三甲医院被广泛应用，国际认可度高，使用CCK-8发表的中外文献达600多篇，其中截止08年底SCI影响因子IF＞10分的论文有37篇，最高IF26.5分

在做CCK-8实验时，如果暂时不测定O.D值，打算以后测定或为了避免每次准备标准曲线，可以加入StopSolution，并遮盖培养板避光保存在0-5℃条件下，在7天内吸光度不会发生变化。

CellCountingKit-8(CCK-8)利用了Dojindo开发的水溶性四唑盐—WST®-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)，它在电子载体1-MethoxyPMS存在的情况下能够被还原成水溶性的甲臜染料,如图.1所示。

CCK-8溶液可以直接加入到细胞样品中；不需要预配各种成分。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。WST®-8被细胞内脱氢酶氧化还原后生成的橙黄色甲臜染料能够溶解在组织培养基中(如图.2所示)，生成的甲臜量与活细胞数量成正比。

主要参考资料

[1]徐丽, 张勤丽, 高福平, 等. 几种细胞毒性评价方法在纳米氧化铝神经细胞毒性研究中的应用比较[D]. , 2010.