人参皂甙 Re的液相检测方法

基本信息

人参皂甙 Re，外文名称：Ginsenoside Re，分子式：C₄₈H₈₂O₁₈，分子量：947.14，是四环三萜类衍生物。无色针状结晶(50%乙醇或含水甲醇)。熔点201~203℃。旋光度0~-1.00 (c=1.00，甲醇)。L-B反应(+)，Molish反应(+)。全乙酰化物为晶粉，熔点136℃。人参皂甙 Re主要来源于五加科植物人参[Panax ginseng C.A.Mey er(P. schinseng Nees)]的根、花蕾、叶、芦头、茎，西洋参(P. quinquefolium L.)的根中。

背景技术

有关研究发现，人参的药理作用与其富含的皂甙成分密切相关，人参皂甙 Re就是其中主要的活性成分之一。将有效成分效率的提取出来，而不使有效成分的量降低，这是提取工艺的关键。有文献报道测定人参中人参皂甙 Re含量的方法有：薄层扫描法、紫外可见分光光度法、HPLC法等，以下将介绍采用反相高效液相色谱法测定人参皂甙 Re含量的方法来反应蒸煮提取的效果，该方法简便、快速、可靠。

检测方法

1、色谱条件

色谱柱YMC-C18柱（150mm×4.6mm），流动相为乙腈-水（25:75），检测波长203nm，柱温室温，流速 1ml/min,在此条件下样品中的人参皂甙 Re与其它相关峰均能达到基线分离。特征峰保留时间在10min左右。

2、对照品贮备溶液及供试品溶液的制备

取人参皂甙 Re对照品约10.0mg精密称定， 置25ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备溶液。称取人参药材10.0g，加水回流提取两次，每次1h，合并滤液，供煎煮稳定性考察使用，精密量取此滤液5ml，加水饱和正丁醇溶液提取4次，每次加入2ml，合并正丁醇溶液，挥干，精密加入0.5ml甲醇溶解，即得供试品溶液。

3、线性关系 

精密吸取对照品贮备溶液适量， 置10ml容量瓶中，用甲醇稀释定容，使浓度分别为9.9,19.8,39.6,79.2,158.4,198,237.6ug/ml, 吸取上述溶液20ul，进样，以人参皂甙 Re的峰面积为横坐标，人参皂甙Re的浓度为纵坐标，回归得标准曲线方程。

4、精密度试验

按上述色谱条件，精密吸取3种不同浓度的对照品溶液于同日内测定5次，,计算其日内精密度；以3种不同浓度的对照品溶液于5d 内分别测定，计算其日间精密度。

5、重现性实验

取上述人参药材煎煮液5份，,按供试品制备与测定项下所述方法测定。

6、加样回收率试验

精密吸取已知含量的供试品溶液适量，分别加入不同量的人参皂甙 Re对照品贮备液，作为测定溶液，测定并计算回收率。

7、样品液的含量测定

精密吸取不同时间的样品液20ul进样分析，记录色谱图，用标准曲线计算得样品液的浓度。

参考文献

[1]周静,王彩琴,袁媛,等. 人参皂甙Re提取方法的研究[J]. 西北植物学报,2003,23(4):667-670.