新型纳米抗体测序服务

背景^[1-4]

新型纳米抗体测序服务可以为客户提供一种卓越的新型纳米抗体测序服务。这项服务基于世界领先的鸟枪法与抗体数据库相结合的技术“Database Assisted Shotgun Sequencing”（DASS）所搭建的专业、新型的抗体测序平台。可以对可溶性与功能性纳米抗体进行VHH结构域序列全覆盖式的精准测序，并且已有数十次进行精确度高达100%的测序的成功经验。

纳米抗体(nanobody,Nb)，即重链单域抗体VHH(variable domain of heavy chain of heavy-chain antibody)，是由比利时科学家于1993年在自然杂志中首次报道。与哺乳动物中的传统抗体不同，骆驼科动物中的重链抗体“heavy-chain antibodies”(HCAbs)缺少一条轻链（如图1绿色结构域），克隆其可变区而得到的只由一个重链可变区组成的单域抗体，是目前可以得到的具有完整功能的稳定的可结合抗原的最小单位。其相对分子质量为15kD，仅为常规抗体的1/10左右，分子高度4.8 nm，直径2.2 nm，为纳米级，故被称为纳米抗体。

纳米抗体具有与传统抗体相同的对目标靶点的高特异性、亲和性与低毒性。并且，与小分子药物类似，纳米抗体具有传统抗体所缺少的的对酶类产生抑制，进入受体缝隙的能力。纳米抗体可用于肿瘤等疾病的治疗、疾病的检测、疫苗的研发等。纳米抗体的稳定性好、亲和力较高，克服了小分子功能抗体的缺点，同时又具有分子质量小、免疫原性弱、组织穿透力强等单克隆抗体、多克隆抗体不具备的优点，适应于食品检测、疾病治疗等方面。该服务可以根据客户需要，提供卓越的新型纳米抗体测序服务，保证对所有纳米抗体可以进行准确率高达99%以上的测序。

应用^[5-8][

纳米抗体抗体由于其小尺寸，简单的生产和高亲和力而允许在生物技术和治疗用途中的广泛应用。纳米抗体测序服务可用于：纳米抗体来源分析及筛选。

  1.重链纳米抗体

通过用所需抗原免疫单峰骆驼，骆驼，美洲驼，羊驼或鲨鱼并随后分离编码重链抗体的mRNA，可以获得单结构域抗体。逆转录和聚合酶链反应，产生含有数百个克隆的单结构域抗体的基因文库通过纳米抗体测序服务可以筛选其来源。

2.血液分离抗体

纳米抗体抗体可以由具有四条链的普通鼠或人IgG 制成。方法是相似的，该方法的问题在于共同IgG的结合区由两个结构域（V H和V L）组成，由于它们的亲脂性倾向于二聚化或聚集。单体化通常通过用亲水性氨基酸取代亲脂性来实现但通常导致对抗原的亲和力丧失，而纳米抗体测序服务可以在不影响其活性的前提下检测抗体来源。

3.重组人类纳米抗体

抗体测序服务用于鉴定重组人类纳米抗体来源及重要结构域。

参考文献

[1] Harmsen MM,De Haard HJ(November 2007)."Properties,production,and applications of camelid single-domain antibody fragments".Applied Microbiology and Biotechnology.77(1):13–22.

[2] Möller A,Pion E,Narayan V,Ball KL(December 2010)."Intracellular activation of interferon regulatory factor-1 by nanobodies to the multifunctional(Mf1)domain".The Journal of Biological Chemistry.285(49):38348–61.

[3] Ghannam A,Kumari S,Muyldermans S,Abbady AQ(2015)."Camelid nanobodies with high affinity for broad bean mottle virus:a possible promising tool to immunomodulate plant resistance against viruses".Plant Molecular Biology.87(4–5):355–69.

[4] "Nanobodies herald a new era in cancer therapy".The Medical News.12 May 2004.

[5] Arbabi Ghahroudi M,Desmyter A,Wyns L,Hamers R,Muyldermans S(September 1997)."Selection and identification of single domain antibody fragments from camel heavy-chain antibodies".FEBS Letters.414(3):521–6.

[6] Feng,Mingqian;Bian,Hejiao;Wu,Xiaolin;Fu,Tianyun;Fu,Ying;Hong,Jessica;Fleming,Bryan D.;Flajnik,Martin F.;Ho,Mitchell(January 2019)."Construction and next-generation sequencing analysis of a large phage-displayed VNAR single-domain antibody library from six naïve nurse sharks".Antibody Therapeutics.2(1):1–11.

[7] Holt LJ,Herring C,Jespers LS,Woolven BP,Tomlinson IM(November 2003)."Domain antibodies:proteins for therapy".Trends in Biotechnology.21(11):484–90.

[8] Borrebaeck CA,Ohlin M(December 2002)."Antibody evolution beyond Nature".Nature Biotechnology.20(12):1189–90.