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重组猴IL-13

发布日期:2020/1/8 8:29:48

背景[1-6]

Recombinant Rhesus Macaque IL-13是(重组猴IL-13)将猴IL-13基因与大肠杆菌重组,再诱导重组大肠杆菌表达目的蛋白。实验主要用于猴IL-13相关研究的免疫组化和WB等实验。白细胞介素13(IL-13)是一种蛋白质,在人中由编码IL13基因。

IL-13于1993年首次克隆,位于染色体5q31上,长度为1.4kb。它的质量为13 kDa,折叠成4个α螺旋束。IL-13的二级结构特征与白细胞介素4(IL-4)相似;然而,它仅与IL-4具有25%的序列同源性,并且能够进行IL-4非依赖性信号传导。IL-13是由T辅助2型(Th2)细胞分泌的细胞因子,CD4细胞,自然杀伤T细胞,肥大细胞,嗜碱性细胞,嗜酸性粒细胞和Nuocyte细胞。

白细胞介素-13是IgE合成,杯状细胞增生,粘液分泌过多,气道高反应性,纤维化和几丁质酶上调的中枢调节剂。它是过敏性炎症和不同疾病(包括哮喘)的中介。IL-13对免疫细胞具有与密切相关的细胞因子IL-4相似的作用。然而,怀疑IL-13是许多组织中由过敏性炎症诱导的生理变化的中枢介质。尽管IL-13主要与气道疾病的诱导有关,但它也具有抗炎特性。IL-13在气道中诱导一类蛋白质降解酶,称为基质金属蛋白酶(MMPs)。

这些酶需要诱导实质炎症细胞侵入气道腔,然后清除它们。在其他因素中,IL-13诱导这些MMP作为一种机制的一部分,该机制可以预防过度易发生窒息的过敏性炎症。白细胞介素-13在杯状细胞化生中起关键作用。杯状细胞充满粘蛋白(MUC)。MUC5AC粘蛋白5AC是杯状细胞的凝胶样粘蛋白产物。白细胞介素-13诱导杯状细胞分化并允许在气管上皮细胞中产生MUC5AC。

15-脂氧合酶-1(15LO1)是脂肪酸代谢中的一种酶及其代谢产物15-HETE,在哮喘中高度表达(导致MUC5AC的过度表达),并由IL-13诱导人气道上皮细胞。随着杯状细胞数量的增加,支气管内产生过多的粘液。MUC染色和分泌变化的功能性后果有助于哮喘患者各种临床异常的病理生理机制,包括痰液产生,气道狭窄,恶化和肺功能加速丧失。

研究应用[7][8]

1.用于研究IL-13和TNF-α在肺炎支原体肺炎儿童血清中的表达及意义

白细胞介素13(interleukin-13,IL-13)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)在小儿肺炎支原体肺炎中的变化。方法酶联免疫方法检测40例肺炎支原体肺炎伴喘息患儿、40例肺炎支原体肺炎不伴喘息患儿、其他病原菌感染肺炎40例(普通肺炎组)及40例正常对照组儿童的血清IL-13和TNF-α的浓度。

结果肺炎支原体肺炎患儿血清IL-13、TNF-α的水平高于正常对照组及普通肺炎组;肺炎支原体肺炎伴喘息患者的IL-13、TNF-α的水平分别为214.6±67.2ng/L,0.55±0.13ng/L,高于不伴喘息者(189.6±52.1ng/L,0.42±0.16ng/mL),差异均有显著性(P<0.01)。结论IL-13、TNF-α浓度增高可能在小儿肺炎支原体肺炎导致喘息样发作中起重要作用。

2.用于研究过敏性与非过敏性哮喘患儿转化生长因子-β及IL-10、IL-13水平研究

过敏性与非过敏性哮喘患儿血清中白细胞介素(IL)-4、IL-10、IL-12、IL-13、γ-干扰素(INF-γ)和转化生长因子-β(TGF-β)在两种类型哮喘致病中的作用。方法采用Pharmacia UniCAP100E系统检测了145例哮喘患儿血清中总IgE(TIgE)和特异性IgE(SIgE),据此分为过敏性哮喘与非过敏性哮喘两组,采用ELISA方法分两批检测了血清中IL-4、INF-γ、IL-12和IL-13(65例,其中过敏性32例,非过敏性33例),IL-10和TGF-β(80例,其中过敏性40例,非过敏性40例),并与血清TIgE进行比较。

结果过敏性哮喘组IL-13、IL-10和TGF-β水平明显高于非过敏性组(P<0.05);IL-13水平与TIgE呈正相关(r=0.453,P<0.05),IL-10和TGF-β与TIgE无明显相关性;过敏性哮喘组IL-12、INF-γ、IL-4水平与非过敏性哮喘组比较P>0.05。结论IL-13、IL-10和TGF-β在过敏性哮喘发病中起重要作用,其中IL-13可能在IgE合成中起主要作用。使用抗IgE单抗或抗IL-13等免疫治疗应针对这两类哮喘患儿采取不同的策略。

参考文献

[1] Minty A,Chalon P,Derocq JM,Dumont X,Guillemot JC,Kaghad M,Labit C,Leplatois P,Liauzun P,Miloux B(March 1993)."Interleukin-13 is a new human lymphokine regulating inflammatory and immune responses".Nature.362(6417):248–50.

[2] McKenzie AN,Culpepper JA,de Waal Malefyt R,Brière F,Punnonen J,Aversa G,Sato A,Dang W,Cocks BG,Menon S(April 1993)."Interleukin 13,a T-cell-derived cytokine that regulates human monocyte and B-cell function".Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.90(8):3735–9.

[3] Morgan JG,Dolganov GM,Robbins SE,Hinton LM,Lovett M(October 1992)."The selective isolation of novel cDNAs encoded by the regions surrounding the human interleukin 4 and 5 genes".Nucleic Acids Res.20(19):5173–9.

[4] Rael EL,Lockey RF(2011)."Interleukin-13 signaling and its role in asthma".The World Allergy Organization Journal.4(3):54–64.

[5] Zurawski G,de Vries JE(January 1994)."Interleukin 13,an interleukin 4-like cytokine that acts on monocytes and B cells,but not on T cells".Immunol.Today.15(1):19–26.

[6] Fahy JV(2002)."Goblet cell and mucin gene abnormalities in asthma".Chest.122(6 Suppl):320S–326S.doi:10.1378/chest.122.6_suppl.320S.PMID 12475809.

[7] 郑跃杰,邓继岿,刘萍,李成荣.过敏性与非过敏性哮喘患儿转化生长因子-β及IL-10、IL-13水平研究[J].华中医学杂志,2007(04):241-243.

[8] 郦银芳,于莹,陆志芳.IL-13和TNF-α在肺炎支原体肺炎儿童血清中的表达及意义[J].中国当代儿科杂志,2010,12(04):275-277.

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