重组猪凝血酶的凝血反应

背景^[1]

凝血酶 (thrombin) 是由凝血酶原活化变成的一种专一性很强的丝氨酸蛋白类水解酶, 是机体凝血系统中的天然成分。凝血酶由308个氨基酸残基所组成, 相对分子质量 (Mr) 为36 000;它是一个双链分子, 由A、B两条链组成, 两条链之间由二硫键连接。凝血酶在体内以凝血酶原形式存在, 在凝血过程中, 凝血酶原复合物将其激活而转变为有丝氨酸蛋白类水解活性的凝血酶, 从而促进血液凝块的形成。由于凝血酶在止血与凝血、组织修复和创伤愈合等方面疗效显著, 具有广阔的市场前景, 目前已成为国内外研究的热点。

目前市售的凝血酶制品主要来源于动物血浆 (包括牛、羊、猪、蛇) 或人血浆, 这类凝血酶不仅可能引起人体的异源性免疫反应, 而且具有传播巨细胞病毒 (CMV) 、EB病毒 (EBV) 、人乳头瘤病毒 (HPV) 、甲型肝炎病毒 (HAV) 及克雅氏病毒 (CJDV) 等病毒的风险性, 尤其是牛源性凝血酶。因此, 利用基因工程方法制备凝血酶制品成为解决这一问题的最理想的途径。

凝血反应^[2]

凝血反应是一组极其复杂的反应,其具体机制尚不完全明确。大量的研究表明,在凝血反应的起始阶段,组织因子(tissue factor,TF)发挥着重要作用。当血管受到损伤时,内皮细胞和血管组织中的组织因子暴露在血液中,并由非活化型组织因子转变为活化型组织因子。活化的组织因子和凝血七因子FⅦ结合形成复合物,并激活凝血十因子FX,活化型十因子FXa催化凝血酶原生成凝血酶(thrombin)。

凝血酶又通过激活凝血十一因子FⅪ和凝血五因子FV等凝血因子而放大凝血反应,从而生成更多的凝血酶。凝血酶切割纤维蛋白原产生不可溶的纤维蛋白,纤维蛋白和部分血细胞形成血栓块。凝血酶是衔接凝血反应激活和纤维蛋白形成的重要一环,在凝血反应中起着一个非常关键的作用,凝血酶的生成量可以间接的表示凝血反应的激烈程度。

参考文献

[1] 重组人凝血酶真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的稳定表达.刘霞 刘飞 刘少英

[2] 蛋白二硫键异构酶调控组织因子介导的凝血酶生成.陈凤梧 鲁翌