吡噻硫酮的药理作用

背景及概述^[1][2]

吡噻硫酮，又叫奥替普拉是法国Rhone-Poulenc厂七十年代中期合成的一种抗血吸虫新药，国外商品名Oltipraz。经动物实验及临床应用，证明对曼氏血吸虫、埃及血吸虫、间插血吸虫均有显著的杀灭作用，对日本血吸虫也有杀灭作用。

制备^[1]

步骤一、吡嗪-2-羧酸甲酯(式3)

将20.0克(805.8毫摩尔)吡嗪-2-羧酸加入到160毫升的甲醇中，搅拌下向其中逐渐滴加1.0毫升的浓硫酸。反应溶液在80至85℃的温度下回流5小时。将该反应溶液冷却至20至22℃，并浓缩至25毫升的体积。然后，向得到的浓缩物中，加入80毫升的二氯甲烷和40毫升的水。然后，得到的溶液通过逐渐加入40毫升饱和碳酸氢钠溶液来中和，得到的PH值为8.5。分离有机层，并且用40毫升二氯甲烷和再次萃取水层。合并的有机层用无水硫酸镁干燥，过滤，并且用20毫升二氯甲烷洗涤。浓缩滤出液，得到21.1克标题化合物，为淡棕色固体(收率94.8％)。熔点：60至61℃

步骤二、2-甲基-3-(吡嗪-2-基)-3-氧代丙酸甲酯(式4)

将1.2升四氢呋喃和87.8克(0.78摩尔)叔丁醇钾加入到反应器中并冷却至0℃。逐滴加入71.5毫升(0.74摩尔)丙酸甲酯至反应器中，且于0℃ 搅拌30分钟。将溶解于500毫升的四氢呋喃中的60克(0.434摩尔)步骤一的吡嗪-2-羧酸甲酯在30分钟滴加至反应器中，并在20至25℃搅拌3 小时。向反应溶液中，加入0.5升蒸馏水和0.5升饱和氯化铵溶液，且搅拌30分钟。将得到的反应溶液浓缩至1.0升的体积，然后用1.0升的二氯甲烷萃取。得到的萃取液用无水硫酸镁干燥，并过滤。浓缩滤出液，得到 75.0克标题化合物，为深棕色粘性油(收率89.0％)。¹NMR(δ，CDCl₃)：1.50(d，3H)，3.65(s，3H)，4.70(q，1H)，8.60(d，1H)， 8.80(d，1H)，9.21(s，1H)

步骤三、奥替普拉的合成和重结晶

将300毫升的甲苯、350毫升的二甲苯和48.0克(216毫摩尔)的五硫化二磷加入到反应器中，加热至120℃至122℃。将40.0克(206毫摩尔)步骤二中制备的2-甲基-3-(吡嗪-2-基)-3-氧代丙酸甲酯溶解于100毫升甲苯，然后滴加入反应器中。使反应溶液在135℃进行回流4小时，然后冷却至20℃。加入500毫升蒸馏水和500毫升甲醇后，用28％的氨水(约51 毫升)，将得到的反应溶液的pH值调节至8.5。分离有机层，用无水硫酸镁干燥，过滤，并减压浓缩。向得到的浓缩物中加入150毫升甲醇，搅拌 1小时，并过滤。滤出液用100毫升甲醇洗涤，得到湿的奥替普拉粗晶体 (12.0至13.0克)。将奥替普拉粗晶体放置在反应器。加入400毫升乙腈，且在80℃溶 解。加入1.4克活性炭并搅拌30分钟。过滤得到的溶液，用100毫升乙腈 洗涤，在20至25℃搅拌结晶2小时，再在10℃搅拌1小时。过滤得到 的晶体，用20毫升乙腈洗涤，并在40℃真空干燥，得到6.37克奥替普拉 (13.6％收率，＞99.5％纯度)。¹NMR(δ，CDCl₃)：2.51(s，3H)，8.70(d，1H)，8.80(d，1H)，9.21(s，1H).

药理作用^[2]

对感染曼氏血趿虫的小白鼠，ED₅₀为每天日服50 mg/kg，连服5天，活性高于硝唑咪2倍。猴体给药ED₅₀为20mg/kg。小白鼠LD₅₀为5g/kg(口服)。鼠与猴体内，无诱变因素和免疫抑制作用。另给剂量45mg/鼠，分3天灌胃，减虫率为71％，减雌率88％。临床治疗埃及、曼氏和间插血吸虫病321例，剂量为每天15mg/kg与25mg/kg连服2天，低剂量组治愈率为86％，高剂量组治愈率为94％。若增加剂量、延长疗程，则疗效更佳。

其他应用^[2]

吡噻硫酮能增加细胞中硫醇含量，诱导对维持谷胱甘肽(GSH)库和亲电分子组织解毒有作用的酶的表达。吡噻硫酮能增加下列酶的活性：NAD(P)H醌还原酶，微粒体环氧化物水解酶，谷胱甘肽转移酶(GST)和 UDP-GT。尤其是，GST保护肝脏免受某些毒性物质如四氯化碳或对乙酰氨基酚的损害(Ansher SS，Dolan P，和Bueding E.，两种二硫醇硫酮和丁基羟基茴香醚对四氯化碳或对乙酰氨基酚毒性的化学保护效果，1983肝脏病 学(Hepatology)3，932-935)。并且，吡噻硫酮能抑制苯并[a]芘、NDEA和尿嘧啶氮芥引起的化学致癌作用，以及黄曲霉素B1-诱导的肝肿瘤发生和azoxymethane-诱导的结肠肿瘤发生(Bolton MG，Munoz A，Jacobson LP，Groopman JD，Maxuitenko YY， Roebuck BD，和Kensler TW.吡噻硫酮保护对抗黄曲霉素-诱导的肝肿瘤发生的短暂干涉，1993，癌症研究(Cancer Res.)53，3499-3504)。已知的通过吡噻硫酮抑制癌发生的机理如下所述。，吡噻硫酮能增加组织中抗氧剂、还原的GSH的水平。第二，它通过抑制I相酶如细胞色素P450而抑制致癌物质的生物活化。第三，它通过诱导包括GST和 UDP-GT的II相解毒酶而使致癌物质解毒。第四，吡噻硫酮能抑制体内I 型人免疫缺陷病毒(HIV)的复制。第五，它能够通过增加硫醇水平和促进 DNA修复而除去反应性中间体。已报道吡噻硫酮能增加大多数组织的GSH 水平，除去由于放射或异生物产生的游离基。还已知通过帮助维持细胞的自动调节，吡噻硫酮能用作对辐射的保护剂。

CN01807369.7报道了吡噻硫酮可以用作有效治疗和预防肝纤维化和肝硬化的临床可行的药物。当含吡噻硫酮药物组合物实际应用时，配制成适合于口服给药的单位剂量形式，按照合适的药物领域的常规方法给药。为此，口服剂型包括硬或软胶囊、片剂、粉末等。除了吡噻硫酮作为药理活性成分外，该口服剂型可以含有一种或多种药理非活性的常规载体介质。例如该口服剂型可以含有添加剂淀粉、乳糖、羧甲基纤维素、高岭土等赋型剂；水、明胶、醇、葡萄糖、阿拉伯胶、黄蓍胶等粘合剂；淀粉、糊精、海藻酸钠等崩解剂；滑石、硬脂酸、硬脂酸镁、液体石蜡等润滑剂。每日剂量根据多种因素，如患者的肝损伤程度、肝炎的发病时间、年龄、健康程度、并发症等。但是对于正常的成年人，一天给药吡噻硫酮一次或两次，每日总剂量为10-1000mg，更优选50-300mg。但是如果患者患有严重的肝损伤或当肝癌切除后用作抗复发药时，本发明可以偏离上述药物组合物的范围，使用更大的剂量。总之，使用吡噻硫酮，一种优异的肝纤维化和肝硬化发展的抑制剂，制备出具有低毒性和几乎没有副作用的药物，该药物不仅用于治疗目的，而且可以通过安全、长期使用达到预防目的。因此，本发明可以安全地长期用于治疗和预防肝纤维化和肝硬化。

主要参考资料

[1] CN200380104287.2 制备奥替普拉的方法

[2] CN01807369.7 吡噻硫酮作为肝中抗纤维化药和抗硬化药的预防和治疗用途以及含有吡噻硫酮的药物组合物