结晶紫染色液

背景^[1][2][3][4]

结晶紫或龙胆紫（六甲基对苯二胺氯化物）是用作组织学染色的三芳基甲烷染料和Gram的细菌分类方法。

结晶紫具有抗菌，抗真菌和驱虫的特性，并且以前作为局部防腐剂是重要的。虽然它仍被世界卫生组织列出，但这种染料的医学用途已被很多现代药物取代。最初用于甲基pararosaniline染料（甲基紫）的混合物，但现在通常被认为是结晶紫的同义词。许多可能的途径可用于制备结晶紫。德国化学家Kern和Caro开发的原始程序涉及二甲基苯胺与光气的反应，得到4,4'-双（二甲基氨基）二苯甲酮（米歇尔酮）作为中间体。这是在随后的存在下与二甲基苯胺附加反应的三氯氧化磷和盐酸。

染料也可以通过甲醛和二甲基苯胺的缩合制备，得到隐色染料。当溶解在水中时，染料具有蓝紫色，在590nm处具有吸光度。染料的颜色取决于溶液的酸度。在pH为+1.0时，染料为绿色，吸收在420nm和620nm，而在强酸性溶液（pH1.0）中，染料为黄色，在420nm处具有吸收。不同的颜色是染料分子的不同带电状态的结果。

在黄色形式中，所有三个氮原子带有正电荷，其中两个被质子化，而绿色对应于一种形式的染料，其中两个氮原子带正电荷。在中性pH下，两个额外的质子都会损失到溶液中，只留下一个氮原子带正电荷。在碱性溶液中，亲核羟基离子攻击亲电子中心碳以产生无色三苯甲醇或甲醇形式的染料。当氮原子上的正电荷导致中心碳的亲电子特性增强时，一些三苯基甲醇也在非常酸性的条件下形成，这允许水分子的亲核攻击。这种效果会使黄色略微褪色。

研究应用^[5][6]

结晶紫不仅用作纺织染料，而且还用于染色纸和用作印刷，圆珠笔和喷墨打印机的海军蓝和黑色墨水的组分。它还用于着色各种产品，如肥料，防冻剂，洗涤剂和皮革。染料也用作组织学染色剂，特别是在用于分类细菌的革兰氏染色中。当进行DNA凝胶电泳时，结晶紫可用作无毒DNA染色剂，作为荧光，嵌入染料如溴化乙锭的替代品。

以这种方式使用，它可以掺入琼脂糖凝胶中或在电泳过程结束后施用。以0.001％的浓度使用，并在电泳30分钟后使凝胶染色，它可以检测少至16ng的DNA。通过使用甲基橙复染剂和更复杂的染色方法，可以进一步提高灵敏度至8ng DNA。

当结晶紫用作荧光染料的替代品时，不必使用紫外线照射;在体外进行DNA克隆时，这使得结晶紫被广泛用作避免紫外线诱导的DNA破坏的手段。在生物医学研究中，结晶紫可用于染色贴壁细胞的细胞核。在本申请中，结晶紫可以作为一个嵌入染料，并允许DNA的定量成比例的细胞的数目。在法医学中，龙胆紫被用来发展指纹。在制备光学显微镜切片时，结晶紫也用作组织染色剂。

在实验室中，含有结晶紫和福尔马林的溶液通常用于同时固定和染色组织培养中生长的细胞以保存它们并使其易于看见，因为大多数细胞是无色的。它有时也被用作在实验室老鼠身上放置识别标记的廉价方法;由于许多实验室小鼠品系都是白化病，因此紫色在皮毛上停留数周。在穿孔时，龙胆紫通常用于标记穿孔的位置，包括表面穿孔。

参考文献

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