结晶紫染色液

草酸铵结晶紫染色液是革兰氏染色法中的一种成分。革兰阳性菌染色中，细胞经草酸铵结晶紫染色后再经Gram碘液处理，形成不溶性复合物，该复合物不能通过细胞壁，不易被脱色，所以保持紫色。染色后细菌与环境形成鲜明对比，可以清楚地观察到细菌的形态、排列及某些结构特征，而用以分类鉴定。

操作步骤(仅供参考)

1、 按实验具体要求操作或参考下列革兰氏染色的方法。
2、 涂片：取待检细菌，于载玻片中央涂成薄层或者在载玻片上滴加少许无菌水，取菌与水混合均匀，涂成薄层。
3、 干燥：涂片后在室温下自然干燥，也可在酒精灯上略加温，使之迅速干燥。
4、 固定：手持载玻片一端，标本面朝上，在酒精灯的火焰外侧快速来回移动。
5、 初染：滴加结晶紫染色液染色，清水冲洗去染色液。
6、 媒染：滴加Gram碘液，并覆盖载玻片室温放置，水洗。
7、脱色：滴加脱色液摇动，直至流下的脱色液不出现紫色为止，立即用水冲去脱色液，终止反应。
8、 复染：滴加沙黄染色液染色，水洗。
9、 干燥。镜检：置油镜观察。

染色结果：革兰氏阳性菌：蓝色至紫色；革兰氏阴性菌：红色。

注意事项

1、涂片之前，应事先在背面做好圆圈标记，以便判断后续试验的位置。
2、待检细菌培养时间会影响染色，阳性菌培养时间过长或已死亡或细菌溶解，常呈阴性。
3、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

结晶紫染色液配制：结晶紫乙醇饱和液(结晶紫2g溶于20mL95%乙醇中)20mL，1%草酸铵水溶液80mL 将两液混匀置24h后过滤即成。