甲基硫氧嘧啶对大鼠骨髓基质细胞增殖与凋亡的影响

背景及概述

甲基硫氧嘧啶，是一种有机化合物，化学式为C5H6N2OS，主要用作心血管药物潘生丁的中间体。2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，甲基硫氧嘧啶在2B类致癌物清单中。本实验旨在通过体外分离、培养及鉴定大鼠骨髓基质细胞，研究甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞增殖与凋亡的影响，探讨其作用机理，以及它对骨髓造血微环境的影响。

图1 甲基硫氧嘧啶的结构式

方法

1.体外分离、培养及鉴定 SD大鼠的骨髓基质细胞，取对数生长期的细胞用于实验研究。

2.应用CCK-8法观察甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞增殖的影响。

3.流式细胞术检测甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞凋亡的影响。

结果

1.通过全骨髓贴壁法得到贴壁生长，形态均一的单层细胞：CD90表达阳性、CD34与CD45表达阴性，鉴定成功。

2.CCK-8法检测结果显示：随着甲基硫氧嘧啶浓度增加与作用时间延长，增殖抑制作用逐渐增强。同一时间，从 40mmollL后随着浓度增加，与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。同一浓度，随着作用时间延长，不同时间组间比较，差异有统计学意义(P<0.05);与12h组比较，差异有统计学意义(P<0.05)。作用48小时，对细胞增殖的抑制作用最强。

3.流式细胞术检测结果显示：从40mmolL后随着药物浓度的增加，细胞的凋亡率逐渐增加，与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)：不同组间比较，差异有统计学意义(P<0.05)。

结论

1.全骨髓贴壁法成功获得SD大鼠BMSCs。

2.甲基硫氧嗉啶对骨髓基质细胞增殖有抑制作用。

3.甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞凋亡有促进作用。

4.甲基硫氧嘧啶对骨髓基质细胞具有一定的细胞毒性作用。

参考文献

[1]Schmink, Jason R.; Kormos, Chad M.; Devine, William G.; Leadbeater, Nicholas E. Organic Process Research and Development, 2010 , vol. 14, # 1 p. 205 - 214