细胞色素P450 19抗体的应用

背景^[1-3]

细胞色素P450 19抗体是一类可以特异性结合细胞色素P450 19的多克隆抗体，主要用于体外检测细胞色素P450 19的免疫学实验。

细胞色素P450（cytochromeP450或CYP450,简称CYP450）代表着一个很大的可自身氧化的亚铁血红素蛋白家族，属于单氧酶的一类，因其在450纳米有特异吸收峰而得名。它参与内源性物质和包括药物、环境化合物在内的外源性物质的代谢。根据氨基酸序列的同源程度，其成员又依次分为家族、亚家族和酶个体三级。细胞色素P450酶系统可缩写为CYP，其中家族以阿拉伯数字表示，亚家族以大写英文字母表示，酶个体以阿拉伯数字表示，如CYP2D6、CYP2C19、CYP3A4等。人类肝细胞色素P450酶系中至少有9种P450与药物代谢相关。

细胞色素P450 19

肝脏的细胞色素P450系统在药物的代谢中起着重要作用，它将药物由疏水型转化为更易排泄的亲水型。生物转化反应一般可分为细胞色素P450依赖的I相和II相结合反应。

CYP1,2,3家族约占总肝P450含量的70%，并负责大多数药物的代谢。根据它们在肝脏的表达,CYP3A约占总肝P450的30%,CYP2约占20%,CYP1A2占13%,CYP2E1占7%,CYP2A6占4%,CYP2D6占2%。在大量的组织内，包括小肠、胰、脑、肺、肾上腺、肾、骨髓、肥大细胞、皮肤、卵巢及睾丸均发现有其他的肝细胞色素P450。

已清楚药物的肝外代谢对体内药物总的降解起一定的作用。胃肠道内的生物转化是非常重要的，因为它可降低口服药物的生物利用度。遗传多态性、酶抑制、酶诱导及生理因素均可引起细胞色素P450活性的改变。这有一定的临床含意，因为这会引起药物药代动力学的改变，导致药物效能改变，因代谢减少或毒性代谢物生成增多而增加药物毒性，以及导致药物的相互作用。

CYP450酶是临床前药物代谢研究的重要对象，涉及药物代谢的CYP450主要为CYP1、CYP2、CPY3家族中的7种重要的亚型，其中，在CYP1家族中存在CYP1A1，CYP1A2，CYP1B1 3种亚型。CYP2家族是CYP450酶系中的家族，包括CYP2A，CYP2B，CYP2C，CYP2D，CYP2E亚家族，其中CYP2C9，CYP2C19，CYP2D6，CYP2E1是其中主要的亚型，而对于CYP2A，CYP2B研究较少。CYP3包括CYP3A3，CYP3A4，CYP3A5及CYP3A7共4种基因亚型，约占肝内CYP450总量的28.8%，是参与口服药物首过效应的重要酶系，研究主要集中在CYP3A1，CYP3A4亚型。

应用^[4][5]

细胞色素P450 19抗体可以用于石斛碱和石斛酚对小鼠肝脏细胞色素P450及肝功能影响

研究石斛碱和石斛酚对主要P450酶的影响,为石斛临床使用时提高疗效以及作为保健品使用安全提供更多的理论依据。本课题还检测石斛酚和石斛碱在低、中、高用量下使用后对小鼠肝功能是否产生影响,对评估估石斛酚和石斛碱的安全性具有重要意义。

主要研究内容和结果包含以下几个部分:1.石斛碱和石斛酚对主要细胞色素P450酶表达的影响本章实验采用C57BL/6小鼠,通过腹腔注射石斛碱和石斛酚,从细胞色素P450酶mRNA和蛋白两个水平研究石斛碱和石斛酚对其表达的影响。RT-PCR实验结果显示,石斛碱可以上调Cyp1a1、Cyp1a2、Cyp2a5、Cyp2d9和Cyp3a11 mRNA的表达;石斛酚可以提高Cyp1a2和Cyp2b9 mRNA的表达。Western blot实验结果显示,石斛碱可以显著上调CYP1A1、CYP2B和CYP2C19蛋白表达;石斛酚可以显著提高CYP1A1、CYP1A2、CYP3A、CYP2B、CYP2C19和CYP2E1蛋白表达。

2. 石斛碱和石斛酚对小鼠主要细胞色素P450酶活性的影响基于上一章研究基础,本章实验研究石斛碱和石斛酚对细胞色素P450酶活性的影响。腹腔注射石斛碱和石斛酚对C57BL/6小鼠进行给药,以酶活力为指标,以底物探针法研究石斛酚和石斛碱对CYP1A1、CYP1A2、CYP2B、CYP2C酶活性的作用。结果显示,石斛碱可显著提高CYP1A1酶的活性,对CYP1A2、CYP2B、CYP2C酶活性没有显著影响;石斛酚对CYP1A1、CYP1A2、CYP2B及CYP2C酶活性均无显著影响。结合上一章实验结果可以看出临床使用石斛以及石斛作为保健品使用时应特别注意其与其他CYP1A1酶代谢相关药物的联合使用。

3.石斛碱和石斛酚对小鼠肝功能影响基于石斛碱和石斛酚对P450酶的影响研究基础上,进一步研究使用石斛碱和石斛酚后是否对小鼠肝功能是否产生一定影响。选取C57BL/6小鼠,腹腔注射石斛碱和石斛酚,对小鼠血清和肝中的相关指标进行测定,且观察肝组织切片。实验结果显示,与空白对照组相比,血清中AST、ALT指标和肝脏中GSH、MDA指标未有异常变化,肝脏组织病理切片显示肝脏细胞也未见明显异常。由此可得出,在本实验所用剂量下,使用石斛碱和石斛酚后,对小鼠肝功能未产生明显异常。

参考文献

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[5]张笑.石斛碱和石斛酚对小鼠肝脏细胞色素P450及肝功能影响[D].江苏大学,2021.