紫菀酮的提取方法及应用

背景及概述^[1][2]

紫菀酮是从一种常见菊科植物—紫菀的根及根茎中提取的。传统医学认为其性温，味苦、辛，润肺下气，具有消痰止咳之功效，常用于用于治疗痰多喘咳、新久咳嗽、劳嗽咳血之症。提取紫菀酮工艺，公开较少，多是采用90-95％乙醇提取，浓缩液用石油醚萃取，硅胶柱反复分离得到紫菀酮。此外还有采用超临界CO₂萃取工艺的，可得到含量80％的紫菀酮。此种方法虽然简单、清洁无污染，但是设备一次性投资高，提取量较少，也不适合工业化生产。

结构

提取方法^[1][2]

一种从牛大力中提取紫菀酮的工艺，包括以下步骤：

S1：将牛大力进行粉碎并过筛子，制得牛大力粉末；

S2：向步骤S1制得的牛大力粉末中加入乙醇，在水浴条件下回流提取2-3次，每次 提取时长为2.1-2.5h，提取完全后合并提取液，调节提取液的pH值至4.2-4.6，温度控制为 45-50℃，通过活性炭脱色除杂，过滤后制得一次脱色液；

S3：将步骤S2制得的一次脱色液浓缩干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.5-6倍体 积的40-45℃的水进行溶解，采用无水乙酸乙酯溶剂进行萃取2-3次，继续用无水乙酸乙酯 进行2-3次结晶处理，结晶过程中固液比为1：4.3-5.1(W/V)，制得结晶粗品；

S4：将步骤S3制得的粗晶经62％-75％的乙醇溶解，调节溶液的pH值至4.2-4.6，温 度控制为45-50℃，通过活性炭脱色除杂，过滤后制得二次脱色液；

S5：将步骤S4制得的二次脱色液浓缩至每毫升中含紫菀酮3％-10％，采用大孔吸 附树脂分离提纯制得紫菀酮的液体，条件为：解析剂为48％-60％的乙醇溶液，其用量是大 孔吸附树脂体积的1.6-3.1倍，水洗区为去离子水，大孔吸附树脂吸附再生溶剂为2.6％- 5.8％的KOH溶液，吸附区流速6-10BV/h，解吸区流速10-20BV/h，水洗区流速20-25BV/h，再 生区流速6-10BV/h，切换时间为700-750s，温度为44-50℃，压力为0.5-0.8MPa；

S6：将步骤S5制得的紫菀酮液体进行浓缩后结晶，所得晶体在温度为40-43℃下真 空干燥，制得紫菀酮。

方法2：一种从紫菀中提取紫菀酮的方法，工艺简单，易于工业化生产。是通过以下技术方案来实现的：取紫菀药材粉碎，加5-7倍量80-90％甲醇回流提取2-3次，提取液加入活性炭脱色，趁热过滤，浓缩至醇浓度30-50％放置结晶，结晶物滤出用碱性醇溶液溶解，滤过调节pH2-5放置沉淀，滤出沉淀物再用碱性醇溶液溶解，滤过调节至中性，静置沉淀，滤出乙醇回流溶解重结晶2-3次，干燥即得。

应用^[3-4]

紫菀酮能显著抑制小鼠的咳嗽反应，有研究探讨紫菀酮体外抗炎作用及其机制。采用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7巨噬细胞建立细胞炎性反应模型，用紫菀酮对其进行干预，实验结束后，Western blot技术检测RAW264.7巨噬细胞p-ERK1/2、IκBα和i NOS蛋白的表达。结果显示与LPS组比较，紫菀酮可显著下调LPS所致炎性RAW264.7巨噬细胞中p-ERK1/2和i NOS蛋白表达(P<0.05)，升高IκBα蛋白的表达(P<0.05)。因此紫菀酮抗炎作用机制与其下调LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞ERK1/2蛋白磷酸化水平，减少IκBα蛋白磷酸化降解和抑制i NOS蛋白表达等环节有关。

还有研究 利用脂多糖诱导RAW264.7巨噬细胞建立细胞炎症反应模型，通过紫菀酮对其进行干预，采用Sun BioTMAm-Blue细胞增殖与活性检测试剂检测紫菀酮对RAW264.7巨噬细胞增殖的影响；Griess法检测细胞培养上清液中NO含量；ELISA法检测细胞培养上清液中白细胞介素^-1β(IL^-1β)和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量。结果显示与空白组比较，50μmol·L^-1紫菀酮组RAW264.7巨噬细胞的增殖抑制率明显高于空白组，0.1，1，10，20，30μmol·L^-1紫菀酮组RAW264.7巨噬细胞的增殖抑制率无显著性差异；10，30μmol·L^-1紫菀酮组NO释放量均显著低于脂多糖组；1，10，30μmol·L^-1紫菀酮组IL^-1β和TNF-α释放量均显著低于脂多糖组。因此紫菀酮呈剂量依赖性抑制脂多糖诱导的RAW264.7巨噬细胞炎性细胞因子IL^-1β，TNF-α及NO的释放，具有体外抗炎作用。

主要参考资料

[1] CN201710296816.7 一种从牛大力中提取紫菀酮的工艺

[2] CN201110151680.3 一种从紫菀中提取紫菀酮的方法

[3] 紫菀酮基于NF-κB信号通路的体外抗炎机制研究

[4] 紫菀酮对脂多糖诱导巨噬细胞释放IL-1β，TNF-α及NO的影响