茚三酮显色及原理
发布日期:2022/12/13 17:02:43
茚三酮又名“茚满三酮”、“水合茚三酮”、是检测α-氨基酸与多肽常用的显色剂。茚三酮与α-氨基酸反应产生蓝、紫或紫红色产物，也和伯胺、一级其它氨基酸、氨、铵盐反应。该反应作为氨基酸的检出法是极为特异的，所以，可用作氨基酸色谱分析的显色剂。
在制备薄层色谱的显色溶液时，有时为了提高显色反应的灵敏性常加入碱（促进亚胺生成）或还原剂（还原醛，促进氨基茚二酮生成），或者加入显色物质的稳定剂（Cd2+，Cu2+）。
配制方法
1. 喷洒溶液：
方法1：95mL 0.2%茚三酮的正丁醇溶液加5mL醋酸。
方法2：溶解0.2-0.3g茚三酮于90mL异丙醇或正丁醇（用水饱和），加入5mL 2,4,6-三甲基吡啶。
方法3：向方法2中加入5mL醋酸。
2. 浸泡溶液：
溶解0.2-0.3g茚三酮于95mL丙酮中，再加入5mL 2,4,6-三甲基吡啶。
3. 检出手续：
喷洒或浸泡薄层板，然后于80-90℃加热30-60分钟。
4. 结果：蓝色斑点
5. 讨论：
为稳定茚三酮复合物的颜色，可以喷洒含有：1mL硝酸铜的饱和溶液，0.2mL 1%硝酸，4mL水，并用甲醇稀释到100mL的混合溶液，然后干燥。
显色原理
