胆固醇酯酶的应用与制备

胆固醇酯酶(EC 3.1.1.13 cholesterol esterase，CHE)也被称为甾醇酯酶，可以在水相中催化胆固醇酯的水解，转化为胆固醇与脂肪酸，也可以在有机溶剂的存在下进行酯化与转酯反应，其广泛存在于哺乳动物与微生物中。哺乳动物来源的CHE属于胞内酶，主要存在于胰脏、血液、肝脏、肾脏等细胞中。1976年UWAJIMA等首次报道分离出1株产CHE的荧光假单胞菌，之后更多微生物来源的CHE被发现，如链霉菌属、酵母菌属、金黄色葡萄球菌等。

结构特性

胆固醇酯酶属于α/β水解酶家族中的酯类水解酶(EC 3.1.1.X，lipolytic enzyme)，该类酶中还包括了脂肪酶。CHE和脂肪酶结构上有很明显的差异，脂肪酶的活性中心被“盖子(lid)”结构包住，而部分CHE中会有固定在N-末端的“帽子(cap)”结构；这两类酶的区别在其水解底物种类的不同，脂肪酶主要作用于长链脂肪酸形成的酯键，CHE主要作用于短链脂肪酸形成的酯键，而少部分CHE也可以水解脂肪酶的底物。

应用

胆固醇酯酶在食品、诊断试剂、污水处理、制浆造纸工业、织物脱脂等领域有广泛的应用。

制备工艺

一种利用微生物发酵技术制备胆固醇酯酶的工艺。其特征是将假单胞菌(Pseudomonas)经配方为0.5～1.5%酵母膏，0.5～1.5%甘油，0.2～0.3%尿素，0.05～0.15%K2HPO4，0.02～0.05%KCl，0.02～0.05%MgSO4及各种诱导剂0.2%～0.5%，PH6.7～7.2的发酵培养基，在湿度30℃～33℃，通气搅拌培养30～40小时，通过分离，提取，盐析、柱层获得胆固醇酯酶。