灵芝酸G的检测方法

背景及概述^[1]

灵芝酸作为灵芝中主要的三萜类物质，已分离到100多种，如灵芝酸A、B、C、D、E、F、G、I、L、ma、md、mg等。灵芝酸大多为四环三萜，是高度氧化的羊毛甾烷。灵芝酸能抑制细胞组织胺的释放，能增强消化系统各种器官的机能，尤其灵芝酸G，目前研究显示，灵芝酸G在诱导肥大细胞活化和参与先天性免疫活动中扮演重要角色。

检测方法^[1]

CN202010454688.6报道了一种定性分析灵芝孢子油中灵芝酸G的检测技术，采用拉曼光谱特征峰信号，选择555cm-1(±3cm-1)、1176cm-1(±3cm-1)作为特征拉曼峰，定性准确，整个检测过程在10分钟内完成，实现快速定性、便捷、低成本检测。本发明采用甲醇超声波对灵芝孢子油中的灵芝酸G进行提取，并用表面增强激光拉曼光谱特征峰信号对灵芝孢子油中的灵芝酸G快速定性，其中：包括以下步骤：

(一)标准品待测液制备

准确称取10mg灵芝酸G标准品，用无水甲醇定容到10mL，得到1000μg/mL的标准待测液。

(二)样品前处理过程

a.称取适量样品，加无水甲醇振荡，置于超声萃取仪中超声10分钟。

b.将提取液摇匀过滤，滤液留待使用。

所述加入的无水甲醇、样品的比例关系为V:m＝10-5:1(mL/g)；优选8-5:1(mL/g)。

(三)表面增强激光拉曼光谱速测分析

取适量滤液并加适量浓硫酸摇匀后，从中取适量作为待测液，依次加入表面增强试剂、酸化剂，记录555cm-1(±3cm-1)、1176cm-1(±3cm-1)有无特征峰。

所述浓硫酸与滤液的体积比为1:1-5；优选1:2；

所述表面增强试剂为金纳米溶胶、银纳米溶胶的任意一种，优选金纳米溶胶；

所述酸化剂为促凝剂，为2mol/L硝酸溶液；

所述表面增强试剂与待测液的体积比为1-10:1；优选2-5:1；

所述酸化剂与待测液的体积比为1:1-10；优选1:1-5。

本发明采用专用并固化于便携式拉曼光谱仪的专用软件来实现一种灵芝孢子油中灵芝酸G的超快速、低成本、现场鉴别方法。一个样品检测时间小于15分钟，操作简单，不需要操作人员有较强的专业背景，读数直观，可直接从仪器界面上读取数值。

本发明首次将该技术应用到灵芝孢子油中灵芝酸G的检测，通过对灵芝酸G的拉曼光谱特性分析，确定灵芝孢子油中灵芝酸G，本发明中检测方法的最低检出限为10ppm。试验在15min内完成，具有准确、快速、无损、低成本的明显特点，适用于现场应急检测、企业自控检测和大批量样品筛查检测等，有效辨别问题灵芝孢子油，保护消费者权益

参考文献

[1] [中国发明] CN202010454688.6 一种灵芝孢子油中灵芝酸G的快速检测方法