染料木苷的检测方法及其在药物制备中的应用

背景及概述^[1][2]

染料木苷(Genistin)是一种异黄酮类化合物，在体内代谢具有雌激素样作用，被称为植物雌激素类药物。染料木苷在人体肠道菌群作用下水解成染料木素，通过竞争性地结合雌激素受体而发挥作用， 在医药行业主要用于治疗妇科类疾病。

制备^[1]

一种从大叶千斤拔中提取染料木苷的方法；该方法的原料丰富易得，工艺简单可行，污染少，周期短，所得产品纯 度高，易于规模化制备。包括以下步骤：

(1)将原料大叶千斤拔切碎，用浓度50～70％的乙醇水溶液回 流提取1.5～5h，得提取液；

(2)将步骤(1)所得提取液浓缩后上色谱柱，所述色谱柱中 的固定相为大孔吸附树脂；以体积比15～25:85～75的乙醇-水溶液为 流动相进行洗脱，收集洗脱液；

(3)将步骤(2)所得洗脱液浓缩至稠状浸膏，加入含有2～3％冰醋酸的乙醇，充分溶解，静置，过滤除去不溶物，将滤液重结晶，用乙醇洗涤晶体，真空干燥，即得染料木苷。

本方法可以得到高纯度染料木苷；无需进行多次分离纯化，只需要进行一次 大孔吸附树脂柱色谱即可得到高纯度染料木苷，方法操作简单，重现性好；仅用到水、乙醇及少量冰醋酸，节省试剂，成本低廉，安全环保；非常适宜大规模、工业化生产。

检测方法^[2]

大豆异黄酮类化合物包括多种化学结构和生物功能高度多样的成员，例如黄豆黄素、芒果苷、大豆苷和染料木苷等。从大豆中提取的大豆异黄酮主要成分是染料木苷。染料木苷是大豆异黄酮的有效成分之一，结构上属于植物雌激素。研究发现染料木苷不能被机体直接吸收，而是经肠道菌中酶水解后以染料木黄酮的形式吸收，发挥生物活性。染料木黄酮在很多方面活性都大于黄豆苷元。

CN201711287750.1提供一种检测蜜醋黑豆中染料木苷的方法。该方法采用甲醇超声辅助提取法提取蜜醋黑豆中的染料木苷，并利用超高效液相色 谱法仪对其含量进行检测的方法，经蜜醋黑豆提取液制备、标准溶液制备、样品溶液制备和超高效液相色谱仪检测等步骤得出蜜醋黑豆中染料木苷的含量。包括以下具体步骤：

S1.蜜醋黑豆提取液制备：将烘干的蜜醋黑豆粉碎，过筛得蜜醋黑豆粉，加入甲醇 溶液A超声，经离心后取上清液，将该上清液浓缩后，用甲醇溶液B定容得染料木苷提取液；

S2.染料木苷标准溶液配制：将染料木苷标准品用甲醇溶液C定容，超声处理，制成 染料木苷标准母液，将染料木苷标准母液用甲醇溶液C定容，配成染料木苷标准液；

S3.样品溶液的制备：将步骤S1所得染料木苷提取液用甲醇溶液C制成稀释液，使其通过滤膜后，保存待用；

S4.超高效液相色谱仪检测：将步骤S3得到的样品进行含量检测，通过流动相为分析纯甲醇、冰醋酸和水，检测蜜醋黑豆产品中染料木苷的含量。

图1为染料木苷12.50μg/L的标准液超高效液相检测图谱。

应用 ^[3-4]

 一、用于制备具有抗衰老效果的组合物

CN201611046133.8提供一种具有抗衰老效果的组合物，以实现在此组合下可增加皮肤的弹性和光泽，以及治疗前列腺增生，高胆固醇血症，动脉硬化，勃起功能障碍以及绝经期、绝经后症状的目的。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：具有抗衰老效果的组合物，其特征在于，所述具有抗衰老效果的组合物包含黄豆 苷，大豆黄素，染料木苷，染料木黄酮和葛根素，其中黄豆苷，大豆黄素，染料木苷，染料木黄 酮和葛根素的重量比为(3*10⁴-7*10⁴)：(6-10)：(0.8*10⁴-1.5*10⁴)：(1-3)：(80-110)。本发明的组合物在在人体内的应用可增加皮肤的弹性和光泽。此外，组合物可用于皮肤保健，乳房护理(包括乳房坚固，丰乳，去除乳房皱纹)以及治疗前列腺增生，高胆固 醇血症，动脉硬化，勃起功能障碍以及绝经期、绝经后症状。用于制造化妆品，药物化妆品，可药用的产品以及保健品，功能食品，饮料。

二、用于治疗高血脂症及动脉粥样硬化的药物组合物

CN201710312895.6提供一种成分明确、质量可控、疗效显著的治疗高血脂症及动脉粥样硬化的药物组合物。所述药物组合物包含活性组分，所述活性组分为葛根素、大豆苷、染料木苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、黄芪皂苷II、黄芪甲苷、芒柄花黄素、桑皮苷A、桑辛素、东莨菪内酯、桑根酮C、1-脱氧野尻霉素、葛根多糖、黄芪多糖、桑白皮多糖中的两种或两种以上的组合。本药物组合物，可以降低动脉粥样硬化模型apoE-/-转基因小鼠的主动脉中脂肪斑块面积，并且具有调节小鼠高血脂作用，能够治疗高血脂症及动脉粥样硬化。

主要参考资料

[1] CN201410826874.2 一种从大叶千斤拔中提取染料木苷的方法

[2] CN201711287750.1 一种检测蜜醋黑豆中染料木苷的方法

[3] CN201611046133.8 具有抗衰老效果的组合物及其应用

[4] CN201710312895.6 一种用于治疗高血脂症及动脉粥样硬化的药物组合物