树莓苷的应用及提取方法

背景及概述^[1][2]

树莓是蔷薇科悬钩子属植物，其果实柔嫩多汁，香味宜人，具有很高的营养价值，富含花青素、鞣化酸、黄酮等抗癌、抗氧化物质。现代医学研究发现，树莓具有抗菌、抗癌、抗炎和增强免疫力等多种生物学作用。树莓含有多种对人体有益的成分，无论从食用方面还是医疗保健作用方面都显示了很好的开发前景，是人们选择天然、安全、营养食品的良好来源。国内对树莓功能物质的研究与欧美国家相比，技术还相对落后，树莓的深加工产业还有很长一段路要走。近年，树莓项目已得到国家科技部、中国农科院等科研部门的肯定和推荐，树莓的引进、发展已被列入国家“948” 计划。因此，研究人员可充分利用此契机，深入研究树莓的营养保健功能及提取技术，开发具有一定功能的保健食品，为我国的食品及医药卫生事业做出贡献。

树莓苷白色或类白色结晶性粉末，易溶于水，溶于乙醇等极性有机溶剂。对树莓酮葡萄糖苷(RKG)、树莓酮半乳糖苷和树莓酮木糖苷的黑色素形成抑制作用进行了对比。结果显示RKG的黑色素抑制作用最强，树莓酮半乳糖苷次之，树莓酮木糖苷无抑制作用。树莓苷(RKG)具有很好的抗老化、美白、亮肤及皮肤调理作用。近年研究表明，皮肤中由一氧化氮合成酶作用而合成的一氧化氮给皮肤造成很大伤害，使皮肤变得粗糙、老 的同时，也成为色素沉积的主要原因之一。树莓苷则是一优良的一氧化氮捕捉剂，添加在护肤品可以有效的消除皮肤中过多的一氧化氮，从而降低酪氨酸酶活性，减少黑色素的形成。

结构

应用^[2][3][4]

树莓鲜果中花色苷量在 40～123mg /100g，树莓苷可作为新型美白调理剂，具有有效阻碍酪氨酸酶的作用，还可抑制黑色素的形成，并且是有效的一氧化氮捕捉剂。众所周知，由紫外线、工作压力等原因而产生的活性氧、过氧化脂质等自由基可引起皮肤炎症，并给皮肤组织造成很大的伤害。近年研究表明，皮肤中由一氧化氮合成酶作用而生成一氧化氮给皮肤造成破坏，使皮肤糙、老化的同时，也成为色素沉积的原因之一。树莓苷是一种优良的一氧化氮捕捉剂，因此其具有优良的抗老化、美白亮肤及皮肤调理作用。树莓苷的物理性质、水溶性、无味性及安全性都表明它可作为一种优良的美白化妆品。

此外，树莓苷还可用于制备各种洗液，如一种丝巾专用洗液的配制方法，是以丹皮酚、树莓苷、烟酰胺、壬二酸、大皂荚、山金车提取液、羟丙甲基纤维素、柠檬烯、AES、益生菌群、乳化剂、侧柏提取液、柠檬酸、糖苷粉、烷基糖苷、多库酯钠、酵素、醋酸、香、水混合配制而成，它具有强化纤维保护成分，在任何时间都让丝巾洁净如新，使用天然提取物和无刺激的洗净成分，不会造成质地损伤及丝巾的变形，让漂洗变的更加简便；一种台布油污机洗液，是以丹皮酚、树莓苷、烟酰胺、壬二酸、大皂荚、山金车提取液、粉状增稠剂、香茅油、AES、益生菌群、乳化剂、侧柏提取液、柠檬酸、乙基醚、烷基糖苷、芦荟苷、酵素、醋酸、香、水混合配制而成，它具有强劲的去污能力，能完全清除常规的附着于台布上的各种污渍，强劲的氧漂能力，能使白的更白，彩的更彩，耐酸碱硬水，中性洗涤。

提取方法^[1][5]

方法1：一种从树莓果实中提取树莓苷和花色苷的方法，步骤包括：

1)将树莓果实匀浆，加入70～80％乙醇水溶液进行混合，30～40℃回流提取30～ 60min，陶瓷膜过滤一次，得提取液和滤渣，其中树莓果实重量kg与乙醇水溶液的体积L比为 1：2～4。

2)滤渣加入一定量的水，再加入3～8％枯草芽孢杆菌粉，35～45℃下保温10～ 24h，陶瓷膜过滤一次，得发酵液，其中加入水的体积L与树莓果实重量kg比为2～5：1。

3)将提取液与发酵液合并，在45～55℃减压进行浓缩至原有体积的1/4～1/10， 5000rpm～8000rpm离心10～30min，去沉淀得到浓缩液Ⅰ，上AB-8大孔树脂吸附浓缩液，并用 三倍至五倍柱体积的含有20～30％乙醇的乙醇水溶液进行洗脱，得到洗脱液Ⅰ；

4)再用三倍至五倍柱体积的含有50～65％乙醇的乙醇水溶液对AB-8大孔树脂进 行洗脱，得到洗脱液Ⅱ，并将洗脱液Ⅱ进行45～55℃减压浓缩至原来体积的1/3～1/15，得浓缩液Ⅱ；

5)将洗脱液Ⅰ进行45～55℃减压浓缩至干得干燥物即为花色苷；

6)将浓缩液Ⅱ放置在4～8℃静置过夜结晶，陶瓷膜过滤一次得结晶物，即为树莓苷粗品，再在4～8℃重结晶得树莓苷纯品。

方法2：一种利用树莓提取SOD酶和树莓苷的制备方法，具体步骤包括如下：

1)将树莓果实匀浆，分别加入果胶酶和纤维素复合酶至终浓度都在10U/mL以上，酶解一定时间，过滤得滤液Ⅰ和滤渣；

2)滤渣再加入水，搅拌提取15～30min，过滤得滤液Ⅱ，合并得提取液，其中山莓果实重量kg与水的体积L比为1：2～4。

3)提取液经超滤浓缩至原有体积的1/5～1/10，得浓缩液Ⅰ和滤过液，浓缩液Ⅰ加入两倍至四倍体积的预冷丙酮，-2℃～3℃下静置15～30min，5000rpm～8000rpm离心10～20min，得沉淀和上清液；

4)沉淀加入水溶解后，5000rpm～8000rpm再次离心10～20min，得清液上金属螯合亲和层析柱，用三倍至六倍柱体积的pH5.0柠檬酸缓冲液洗脱，收集洗脱液，经超滤除去 无机盐，即得超氧化物歧化酶，其中沉淀的重量g与水的体积mL比为1：10～25。

5)将滤过液和上清液合并，在45～55℃减压进行浓缩至原有体积的1/10～1/25，得到浓缩液Ⅱ，上S-9大孔树脂吸附，用三倍柱体积的水进行冲洗，并用两倍至四倍柱体积的20～35％乙醇溶液进行洗脱，得到洗脱液Ⅰ；

6)再用三倍至五倍柱体积的60～85％乙醇溶液对S-9大孔树脂进行洗脱，得到洗脱液Ⅱ，并将洗脱液Ⅱ进行45～55℃减压浓缩至原来体积的1/8～1/15，得浓缩液Ⅱ；

7)将洗脱液Ⅰ进行45～55℃减压浓缩至干得干燥物即为花色苷；

8)将浓缩液Ⅱ放置在4～8℃静置过夜结晶，过滤得结晶物，即为树莓苷粗品，再在4～8℃重结晶得树莓苷纯品。

主要参考资料

[1] CN201710579709.5 一种从树莓中提取树莓苷和花色苷的方法

[2] 高玉李, 辛秀兰. 树莓功能性成分及提取方法的研究进展[J]. 食品工业科技, 2011, 32(7): 451-454.

[3] CN201710004905.X一种丝巾专用洗液的配制方法

[4] CN201710005213.7一种台布油污机洗液的配制方法 

[5] CN201710582886.9 利用树莓提取SOD酶和树莓苷的制备方法