PARP Rabbit Monoclonal Antibody

背景^[1][2]

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（Poly（ADP-ribose）polymerase，PARP）是一类存在于所有哺乳动物细胞及大部分真核生物细胞中的蛋白质翻译后修饰酶，PARP 家族蛋白主要催化ADP- 核糖单元从烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）转移至各种受体蛋白，在DNA 损伤修复、维持基因组稳定性方面起着重要作用。　聚腺苷二磷酸核糖基化作用（PARylation是一种蛋白质翻译后的修饰，PARP 家族的酶具有PARylation 活性，这种修饰的结果是使靶蛋白接受腺嘌呤分子，携带长链多聚腺苷二磷酸核糖。

PARylation 最初由Paul Mandel 在1963 年发现，其修饰的蛋白质是一种半衰期较短的蛋白质翻译后修饰方式，长链修饰基团暴露于ADP- 核糖水解酶和多核糖水解酶下会被迅速去修饰。尽管目前PARP 家族有17 种酶，但是目前认为只有6 种（PARP-1、PARP-2、PARP-3、PARP-4、PARP-5A和PARP-5B）真正具有PARylation 的催化活性，而其他成员则只具有单一（ADP- 核糖基）转移酶的功能或没有催化活性。

单克隆抗体技术起源于Kohler等创建的体外鼠源杂交瘤技术。经多年研究，鼠单抗已从单纯的生物实验室科研及临床诊断发展到治疗性抗体药物。但鼠单抗的主要缺陷是小鼠免疫系统不能识别某些免疫原，尤其是鼠源性的免疫原，而且鼠单抗的亲和性不如兔来源抗体的亲和性高。

然而由于没有发现兔源性的浆细胞瘤及病毒体外转染兔B细胞的技术困难，直到1995年在c-myc/v-abl转基因兔身上成功地获得了兔浆细胞瘤细胞系，得到了稳定的兔-兔杂交瘤，才使兔单克隆抗体技术有了突破性进展。近年兔单克隆抗体技术日臻完善，目前商品化的兔单抗已达数千种。

PARP兔单克隆抗体可用于印迹分析，流式细胞仪检测等，有实验探讨 β-榄香烯对多药耐药胃癌细胞 SGC7901/Adr 的耐药逆转及其对聚腺苷二磷酸聚合酶（PARP）和 P-糖蛋白（P-gp）表达的影响，采用MTT 法检测细胞的药物敏感性及耐药逆转，流式细胞术检测细胞内药物累积，流式细胞术 PI 染色检测细胞凋亡，Western blot 检测蛋白表达，其中使用的PARP兔单克隆抗体购自 Cell Signaling 公司。

应用^[1]

1. 在生物标记物开发中的应用

兔单克隆抗体包括PARP兔单克隆抗体广泛用于生命科学研究的各个领域，尤其在免疫组织化学以及检测蛋白的转译后修饰方面具有独特优势。至今已有100多种兔单克隆抗体开发用于癌症的IHC临床诊断与研究，其中最具代表性的就是Her2和c-Kit的IHC诊断试剂盒。在蛋白修饰研究领域，如蛋白的磷酸化，在与疾病相关的蛋白质信号通路中起到了至关重要的作用，使用磷酸化蛋白的兔单克隆抗体可以非常清楚地显示蛋白的磷酸化程度。目前已有200多种磷酸化特异性的兔单克隆抗体面世。

2. 在治疗抗体药物开发中的应用

临床使用的大多数治疗用抗体均需经体外亲和力成熟这一步骤，以提高抗体的亲和力。这一过程常需8至12个月，最终亲和力在纳摩尔级(10-9 mol/L)。兔单抗不需使用体外亲和力成熟，就能达到10-11至10-13 mol/L。这种高亲和力不仅减少抗体的临床使用量，还能减少由于使用大量抗体带来的副作用。但这种高亲和力的优势还需在动物和临床试验中进一步证实。

另外，与鼠单抗的人源化相比，兔单克隆抗体的人源化更容易。因为，兔单克隆抗体主要由一种重链及轻链基因构成，通过分析大量的兔单克隆抗体序列发现，兔与人的抗体同源性更高，约60%～76%，而小鼠与人的抗体同源性略低，为57%～72%，说明用兔单克隆抗体开发药物前景更广阔。

主要参考资料

[1] 李婷婷, 崔慧斐. 兔单克隆抗体的发展及应用前景[J]. 食品与药品, 2012, 14(9): 373-376.

[2] 孙芩玲, 潘钰, 范丽梅, 等. PARP 抑制剂与肿瘤单克隆抗体联用的疗效及机制[J]. 肿瘤药学, 2016, 6(6): 401-406.

[3] 张晔, 宋娜, 刘云鹏, 等. β-榄香烯逆转胃癌细胞株阿霉素耐药性的作用及机制研究[D]. , 2011.