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PARP (Cleaved) Monoclonal Antibody

发布日期:2020/10/24 7:56:57

背景[1]

在哺乳动物细胞内,PARP酶家族至少包括17个成员,然而,只有PARP1、PARP2和PARP3参与DNA损伤修复活动。其中,PARP1酶参与细胞内85%以上的PARP酶活动,PARP3与PARP1形成异构二聚体参与DDR反应。PARP1和(或)PARP2参与DNA单链损伤修复,PARP1也参与DNA双链损伤修复。

PARP1和PARP2功能有部分重叠,但对底物选择性有差异。PARP3在DNA双链损伤修复中起招募修复蛋白和DSB末端连接复合物的支架作用。PARP是DDR通路的重要DNA断裂分子感受器,在DNA损伤后被激活,PARP可以感受DNA单链损伤缺口,并结合到DNA断裂部位,结合PARP酶后的催化活性增强500倍以上。

PARP通过自身的糖基化来催化烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)分解为烟酰胺和ADP核糖,再以ADP核糖为底物,使受体蛋白以及PARP1自身发生“PAR化”,形成PARP-ADP核糖支链。这样一方面可以阻止损伤部位周围的DNA分子与损伤的DNA进行重组,同时吸引DNA修复蛋白、组蛋白H1和一系列转录因子结合在DNA损伤处;另一方面,可以降低PARP1与DNA的亲和性,使PARP1从DNA断裂处解离,然后DNA修复蛋白与DNA缺口结合,对损伤部位进行修复。而PARP1的“PAR化”会被其他酶清除,使得PARP1恢复活性。

PARP(剪切的)单克隆抗体为在人PARP的214/215切割位点附近含有氨基酸的合成肽,产品为100 ug 无色溶液,其浓度为0.5 mg/ml,溶解于包含有50%甘油,1% BSA和0.02% 叠氮钠的PBS缓冲液中。

PARP(剪切的)单克隆抗体可用于WB,IP,IF,ICC,FC,不同应用浓度不同。PARP(剪切的)单克隆抗体于-20℃保存,Western一抗稀释液-20℃或4℃保存,一年有效。Western一抗稀释液优先推荐4℃保存,长期不使用可以考虑-20℃保存,但冻融可能会导致出现轻微的浑浊和少量不溶物。 如果PARP(剪切的)单克隆抗体用于Western blot (WB)、免疫荧光(IF)、免疫细胞化学(ICC)等实验,请注意回收使用过的稀释抗体。

回收的抗体通常至少可以重复使用5-10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,请4℃保存。 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。

主要参考资料

[1] 郑宇静, 左彤彤, 封宇飞. 靶向 DNA 损伤反应途径: PARP 抑制剂抗肿瘤治疗研究进展[J]. 2018.

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