YAC-1小鼠淋巴瘤细胞的应用

背景^[1-3]

YAC-1小鼠淋巴瘤细胞是一个淋巴瘤细胞，将Moloney白血病病毒(MLV)接种到新生A/Sn小鼠中生成。YAC-1细胞对NK细胞的活动敏感，对于NK细胞活性检测十分有用。YAC-1小鼠淋巴瘤细胞是淋巴母细胞样悬浮细胞，培养条件：气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃。

YAC-1小鼠淋巴瘤细胞

细胞培养步骤：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备DMEM培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养，补加培养基至6ml。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%，即可进行传代培养。

1.将细胞悬液按1：2到1:5比例分到新皿中或者瓶中，补加培养基至6ml，放入培养箱继续培养。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

应用^[4][5]

用于钝顶螺旋藻两个生态种多糖的抗菌、抗肿瘤活性及其机理的研究

以鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻和非洲Chad湖钝顶螺旋藻为材料,分离、提取、纯化和鉴定了其多糖,并对多糖的抗菌、抗肿瘤活性及其作用机理进行了比较研究,以期为鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻及其多糖产品的开发、新的抗肿瘤药物的筛选和寻找天然的抗生素替代品及动物免疫增强剂奠定理论和应用研究基础。

采用S180腹水瘤动物模型,考察了ESP和FSP对小鼠体内S180腹水瘤的抑制作用,同时采用MTT和ELISA等实验技术方法检测了ESP和FSP对肿瘤鼠脾淋巴细胞增殖及免疫细胞因子水平的影响,初步探讨了ESP和FSP对荷瘤小鼠免疫增强作用的分子机制。

结果:ESP和FSP均能改善荷瘤小鼠的生存质量,抑制小鼠S180移植性肿瘤的生长,缩小肿瘤在体内的浸润范围,延长小鼠的生存时间,中剂量的作用效果最明显,对荷瘤小鼠的生命延长率分别达到50.67%和52.00%。对免疫功能的影响表现为,能在一定程度上降低肿瘤小鼠的脏器损伤,提高肿瘤小鼠的胸腺和脾脏指数,进而提高小鼠的免疫功能;在抑制肿瘤生长的同时,ESP和FSP还能够提高荷瘤小鼠血清IL-2、TNF-α和IFN-γ水平。

在体外,ESP和FSP均能够促进ConA诱导的荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖反应。ESP和FSP中剂量组的对荷瘤小鼠免疫细胞因子、脾淋巴细胞增殖和免疫器官指数的影响最明显。以上分析表明,适宜剂量的ESP和FSP对S180腹水型肿瘤有明显的抑制作用,并能增强荷瘤小鼠由T细胞主导的细胞免疫功能,提高机体的免疫调节作用,免疫调节可能是其抗肿瘤作用的机制之一。

采用MTT法研究了ESP和FSP体外对小鼠肉瘤S180,小鼠白血病细胞L1210、人慢性髓性白血病细胞K562和小鼠淋巴瘤细胞YAC-1生长的影响;采用流式细胞术（flow cytometry,FCM）研究ESP和FSP对S180细胞周期和细胞凋亡的影响。

结果:ESP和FSP高、中、低三个剂量组对小鼠肉瘤细胞S180、小鼠白血病细胞L1210、人慢性髓性白血病细胞K562、小鼠淋巴瘤细胞YAC-1的体外增殖均有不同程度的抑制作用;但是,仅ESP和FSP中剂量组对K562的抑制率超过了30%,分别为35.88%和33.98%。ESP和FSP均表现出中剂量的对这4种肿瘤细胞体外增殖活性的抑制作用最明显,但其对S180、YAC-1和K562的抑制作用均显著低于CTX组（P<0.05）。

与黄芪糖组相比,仅ESP和FSP中剂量组对K562和FSP中剂量组对YAC-1细胞增殖活性的抑制作用显著高于黄芪糖组（P<0.05）。FCM结果显示,ESP和FSP均能引起细胞周期时相的改变,阻滞S180细胞于G1期,诱导细胞凋亡,并以中剂量组的作用效果最为明显（P<0.05）。

参考文献

[1]Morphological and genetic characterization of a cultivated Cordyceps sinensis fungus and its polysaccharide component possessing antioxidant property in H22 tumor-bearing mice[J].Jiaping Chen,Weiyun Zhang,Tingting Lu,Jing Li,Yi Zheng,Lingdong Kong.Life Sciences.2006(23)

[2]Growth-inhibitory effects of aβ-glucan from the mycelium of Poria cocoson human breast carcinoma MCF-7 cells:Cell-cycle arrest and apoptosis induction[J].Mei Zhang,Lawrence Chiu,Peter Cheung,Vincent Ooi.Oncology Reports.2006(3)

[3]Study for anti-angiogenic activities of polysaccharides isolated from Antrodia cinnamomea in endothelial cells[J].Jing-Jy Cheng,Nai-Kuei Huang,Tun-Tschu Chang,Danny Ling Wang,Mei-Kuang Lu.Life Sciences.2005(26)

[4]Effect of lycium barbarum polysaccharide on human hepatoma QGY7703 cells:Inhibition of proliferation and induction of apoptosis[J].Min Zhang,Haixia Chen,Jin Huang,Zhong Li,Caiping Zhu,Shenghua Zhang.Life Sciences.2005(18)

[5]杜玲.钝顶螺旋藻两个生态种多糖的抗菌、抗肿瘤活性及其机理的研究[D].内蒙古农业大学,2010.