酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂(YPD)对照培养基的应用

背景^[1-3]

酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂(YPD)对照培养基为淡黄色均一粉末，加入水中混悬均匀，灭菌后为黄色半透明液体，用于测定酵母菌总数。

成分(g/L)：蛋白胨10.0葡萄糖20.0酵母浸出粉5.0琼脂14.0。

检验原理：蛋白胨提供碳源和氮源；酵母浸出粉提供B族维生素能促进生长；葡萄糖提供能源；琼脂是培养基的凝固剂。

酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂(YPD)对照培养基

用法：称取本品49.0g,加热溶解于1000ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟,备用。

对照品培养基系指按培养基处方特别制备、质量优良的培养基，用于培养基适用性检查。常用于对照试验。

通常，一个对照实验分为实验组和对照组。实验组，是接受实验变量处理的对象组；对照组也称控制组，对实验假设而言，是不接受实验变量处理的对象组，至于哪个作为实验组，哪个作为对照组，一般是随机决定，这样从理论上说，由于实验组与对照组无关变量影响是相等、平衡的，故实验组与对照组两者之差异，则可认定为是来自实验变量的效果，这样实验结果是可信的。

应用^[4][5]

用于有机结合铁锌转化菌种的筛选鉴定及其药理活性研究

铁和锌都是人和动物生命活动中不可缺少的重要微量元素,与很多基础性生理活动密切相关。缺铁会引起人及动物缺铁性贫血；缺锌会影响身体和智力发育、免疫力低下及一些其他相关疾病。通过微生物转化,尤其是利用酿酒酵母转化可获得结合态的有机铁、有机锌,并具有低毒和高吸收利用率的特性,但是利用酵母转化,存在转化效率低,且遗传不稳定等问题。

从自然环境中筛出选具有高富集铁、锌能力的菌株进行研究。1、本实验采用含有高浓度铁、锌的培养基,通过逐步增加铁、锌浓度的方法,最终获得了高富集铁菌株BY-1109,其耐铁量为10000mg/L,细胞铁富集量达10.23mg/g干重,和高富集锌菌株LZ-1108,其耐锌量为8000mg/L,细胞锌富集量达6.7mg/g干重。

2、实验对高富集铁、高富集锌菌株进行了形态学和分子生物学鉴定,对其发酵条件进行了优化。分子生物学鉴定表明,高富集铁菌株与已发表胶红酵母（Rhodotorula mucilaginosa）的18s rDNA序列具有99%的同源性,初步鉴定该菌为红酵母（Rhodotorula）,其形态学与该属相符。该菌株发酵条件为：pH7.0在含有铁离子浓度为8000mg/L的YPD培养基中30℃培养72h。高富集锌菌株其与已发表尖孢镰刀菌（fusarium oxysporum）的18s rDNA序列具有99%的同源性,初步鉴定为镰刀菌属（Fusarium）,且形态学鉴定及生理生化特性均与该属相符。

该菌株的发酵条件为：pH7.0在含锌离子浓度为6000mg/L的PDA培养基中28℃培养72h。实验结果还发现,高富集铁菌株BY-1109可以在以肌醇为唯一碳源的培养基中生长较好,该特点与红酵母属不符,这需要进一步研究以确定该菌是否为红酵母属的一个变种或者是一个新种。

3、实验分析了高富集铁菌株将无机铁转化成有机铁及铁在细胞中的分布情况和结合状态。实验结果表明：生长在加有硫酸亚铁培养基中的高富集锌菌株,其细胞壁、细胞膜、液泡、线粒体和胞质溶胶的铁含量明显高于生长在对照培养基的菌株,细胞壁、细胞膜和胞质溶胶的铁含量尤其高。说明铁离子主要分布在细胞壁、细胞膜和胞质溶胶,并与之结合形成有机态铁。

4、实验研究了高富集铁、高富集锌菌株的生物利用度。将高富集铁、高富集锌菌株分别以10mg/Kg的剂量对大鼠进行灌胃,测定其生物利用度。