异甘草苷在制备治疗皮肤创伤愈合药物中的应用

背景技术

皮肤组织的创伤愈合是一个复杂的过程。研宄表明，难以愈合的创伤一般伴有毛 细血管生成数量减少，各种细胞生长因子含量降低，细胞增殖能力下降，胶原合成减少，细 胞外基质过度降解等因素。胶原是构成修复组织的主要细胞外基质成分，由成纤维细胞摄 取甘氨酸、脯氨酸、赖氨酸等氨基酸，经细胞内和细胞外两个阶段而形成。同时，组织修复需 要毛细血管为其提供氧和必要的营养物质，如果毛細血管生成减少就会影响创面愈合。

中药促进皮肤愈合的作用十分广泛，可涉及愈合的各个环节，研宄中药对创面血 管生成的影响和对相关细胞生长因子分泌的影响已成为临床实践中关注的热点。

异甘草苷，英文名为Isoliquiritin，属于查尔酮型黄酮苷（化学结构见下式），是甘草中的主要黄酮类成分，可作为 甘草药材及其制剂质量控制的对照品。目前对于异甘草苷单体成分的活性研宄主要集中在 抗氧化、抗溃疡、抗炎活性的研宄报道，异甘草苷还能够抑制脂质过氧化，并能抑制酪氨酸 单酚酶的活性作用，可作为潜在的美白化妆品添加剂。

近年来，黄酮类结构化合物被广泛报道具有血管新生调节活性，其中，毛蕊异黄酮 作为其中的代表性化合物，已被报道具有显著的促血管活性。

尚未见有异甘草苷对治疗皮肤创伤愈合的相关报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供异甘草苷在制备治疗皮肤创口愈合药物中的 应用，其效果明显。

发明人意外发现异甘草苷能够促进皮肤创口愈合，因此，本发明提供异甘草苷在 制备治疗皮肤创口愈合药物中的应用。

所述的促进创口愈合是通过促进创面毛细血管和胶原纤维的形成，缩短皮肤创伤 愈合时间实现的。

所述的药物剂型为口服给药剂型、注射给药剂型、粘膜给药剂型或经皮给药剂型， 具体来说，包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、口服液、注射液、凝胶剂或贴剂等剂型。可以通过本领 域已知的方法制备药物剂型。

有益效果：本发明以异甘草苷在大鼠皮肤创伤模型上进行验证，结果显示异甘草 苷对毛细血管和胶原纤维形成具有促进作用，进而实时观察药物对于皮肤创面的保护与恢 复作用，实验结果表明异甘草苷对皮肤创面具有明显的促进愈合作用，且与剂量成一定的 量效关系。本发明的异甘草苷可作为潜在治疗皮肤创伤愈合的候选药物。

具体实施方式

根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实 施例所描述的内容仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本 发明。

试验药物：异甘草苷购于南京泽朗医药科技有限公司，纯度>98.0% (HPLC法），溶 于DMS0中配制成浓度为100mM的储备液，分装并于-20°C保存。

大鼠皮肤难愈性创伤模型制备：

30只SD雄性大鼠，适应性喂养3d，分为两组，各15只。

对照组：一般皮肤损伤模型：用4%水合氯醛（10L/kg)腹腔注射麻醉后，剃去大鼠 背部长毛，用直径为2. 6cm的圆形塑料环藤龙胆紫在背部正中标记造模面积，在无菌条件 下剪去大鼠造模区皮肤，深达筋膜。

造模组：皮肤缺损+激素干预：用4%水合氯醛（10L/kg)腹腔注射麻醉后，剃去大 鼠背部长毛，用直径为2. 6cm的圆形塑料环藤龙胆紫在背部正中标记造模面积，在无菌条 件下沿脊推方向作两条深达筋膜的切口，造成全层皮肤缺损开放性创面。在大鼠股肌注射 氢化可的松（60mg/kg)，连续3d;6层医用纱布覆盖创面，用橡皮膏包扎固定。14d后，腹主 动脉取血处死，剪取未完全愈合处皮肤，大小为0. 3cmX0. 2cm，置于4%多聚甲醛溶液中固定。

观测指标

一般情况：观察造模后大鼠整体情况，记录每日体重变化情况。

创面愈合面积

记录每日创面愈合面积，用透明膜覆创面画膜、剪膜，置分析天平称取质量并换算 成面积并计算创面愈合率。

创面愈合率=(给药前创面面积-未愈合创面面积）/给药前创面面积X100%

组织形态学观察

大体观察：肉眼观察各组大鼠创面形态。组织形态学观察：将置于4%多聚甲醛溶 液固定的肉芽组织进行脱水、透明、浸錯、包埋、切片，进行染色，光学显微镜下观察组织 形态。

数据处理

通过GraphPadPrism6. 0软件统计作图，分析实验结果。

结果

1、大鼠一般情况及体重变化情况

由图1所示，造模后，大鼠体重出现下降。实验期间，出现食少、便溏，有的大鼠还 出现尾冷、嗜睡、活动减少等症状，并且体重有随时间变化的趋势。

2、造模后创面形态及创面愈合率

由图2可知，造模后创面渗出液量较多，创面颜色晦暗，毛细血管数量较少；时间 对创面愈合率变化有显著作用。激素诱导造模可延缓创面愈合。

3、创面组织形态学观察

HE染色显示：造模组创面有新生的表皮，但较薄，结构不完整，未完全覆盖创面。 痂皮下有组织液，真皮层中毛细血管和胶原纤维较少。

结论：

大鼠的自愈能力很强，一般的皮肤损伤模型，很难满足用药周期的要求，模型的创 面表现与临床的用药指症也相去甚远，所以我们实验研宄釆用糖皮质激素诱导造模。研宄 表明注射了氢化可的松的大鼠出现饮食减少、体重下降、尾冷等症状；染色显示也说明 激素干预可以加重创面的损伤程度，降低毛细血管和胶原纤维的再生能力。