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脱氧核糖核酸的保存

发布日期:2019/11/2 13:16:10

背景及概述[1][2]

脱氧核糖核酸即DNA,生物体遗传信息的主要载体,是由许多脱氧核糖核苷酸按一定顺序连接组成的长链大分子,分子量从106~1011或更多。遗传的最小功能单位基因就是DNA分子的一个片段。 组成DNA的核苷酸由脱氧核糖、磷酸和碱基组成。由于构成每个核苷酸的脱氧核糖和磷酸都相同,所以通常用碱基序列来表示DNA的一级结构。DNA含有4种主要的碱基:腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胞嘧啶(C)和胸腺嘧啶(T)及少量稀有碱基。

1953年沃森和克里克提出了举世闻名的DNA双螺旋结构模型,描述了DNA的二级结构,也由此揭开了分子生物学的序幕。它的要点是DNA分子是由两条反向平行的多核苷酸链围绕同一中心轴构成的右手双螺旋(后又发现了左旋DNA的 存在);每条链的磷酸基(P)和脱氧核糖(S)在外侧,通过磷酸二酯键相连构成DNA的骨架;两条链靠碱基互补即A和T,C和G配对时形成的氢键连在一起构成一种双螺旋结构。

DNA双螺旋分子在体内扭曲能形成复杂的三级结构,最常见的DNA三级结构为超螺旋形式,环状DNA多形成这种结构,线型DNA的两端同时固定也可形成超螺旋结构。真核细胞染色质的DNA结构非常复杂,双螺旋DNA分子先盘绕组蛋白形成核粒,由核粒构成的念珠状结构进一步盘绕压缩成更高层次的结构。真核细胞染色体区别于原核细胞DNA有许多特点,如有大量重复序列等结构的存在,大多数真核生物为蛋白质编码的基因都含有居间顺序(或内含子),它们被转录,但经转录后加工被切除。这些特点和真核细胞的特殊功能和调节有关。 

结构

应用[2]

脱氧核糖核酸携带着遗传信息,在生物体生长、发育和繁殖过程中起着重要作用, 可应用于很多领域,如癌症诊断,药物治疗和种属鉴别等。如一种脱氧核糖核酸降解片断复合物,它是由猪内脏中分离纯化出的脱 氧核糖核酸的人工降解片断组成的,所述脱氧核糖核酸人工降解片断的核苷酸数量范围在5~500之间,分子量在1.5×103~1.5×105之间,所述脱氧核糖核酸降解片断复合物在治疗肝癌、艾滋病或衰老等多基因疾病药物的制备中具有一定的应用。

制备[3]

一种食用油中脱氧核糖核酸的提取方法,首先向食用油中加入脱氧核糖核酸提取液,超声乳化后分离出含脱氧核糖核酸的水相;然后向水相中加入脱氧核糖核酸沉淀剂,沉淀出脱氧核糖核酸。提取过程中通过低能量超声乳化富集样品中的DNA,缩短了样品的前处理时间,耗时短,提高了DNA的提取效率,并且避免了待检测样品之间的交叉污染,提取结果更准确可靠。

保存方法[4]

由于在运输过程中,沾有受试者组织的采集棒会碰撞瓶身而影响采集浓度,且以 干燥方式保存脱氧核糖核酸会使脱氧核糖核酸降解(degradation)而影响后续检测的准确性。此外,采集棒与所采集样品之间的亲和性,会影响溶解于后续处理溶液中的脱氧 核糖核酸含量。

例如,当样品附着于采集棒的附着力大于样品与后续处理溶液之间的 作用力,将使得大量的样品残存于采集棒上;又如采集棒本身的材质与后续处理溶液 所存特定化学官能基甚或会影响样品的降解程度,进而影响样品中脱氧核糖核酸的质量。

因此,本技术领域中实有稳定保存由受试者采取的脱氧核糖核酸的技术需求。有研究公开一种保存脱氧核糖核酸的方法,其包括齐备一具有平滑表面的采集部的采集棒,其中采集部沾有脱氧核糖核酸;将该采集棒置于一含有缓冲液的保存瓶以延长脱氧核糖核酸的保存时间,其中该缓冲液含有浓度介于20毫摩尔(mM)至60mM的乙二胺四乙酸(ethylenediamine?tetraacetic?acid,EDTA)。

本发明的保存脱氧核糖核酸的方法,是通过特定浓度范围的乙二胺四乙酸以避免脱氧核糖核酸降解,并通过采集棒与缓冲液的选择性适用以延长脱氧核糖核酸的保存时间,进以提高检测的准确性。

主要参考资料

[1] 中国成人教育百科全书·生物·医学

[2] 周锡漳;林迪栩.一种脱氧核糖核酸降解片段复合物及其制备药物的应用. CN200810056360.8,申请日20080117

[3] 潘建青;吴慧英;王立平.食用油中脱氧核糖核酸的提取方法CN201010596930.X ,申请日20101220

[4] 施惠馨;林咏翔;关淑君;黄雪茵;蔡岳颖.保存脱氧核糖核酸的方法. CN201410088995.1,申请日20140312

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