胶原蛋白的提取方法

背景及概述^[2-3]

胶原蛋白是一种生物高分子,是动物结缔组织的重要组成部分,对于维持细胞、组织和器官等的正常生理功能有着重要的作用。由于其具有良好的生物特性,胶原蛋白在食品、化妆品、生物学以及医学等方面都有着广泛的应用。

胶原蛋白是什么胶原蛋白是一种生物高分子,是动物结缔组织中的主要成分,属于动物体内的功能性蛋白,占体内蛋白质总量的25%～30%。胶原蛋白目前被广泛应用于生物医学材料、美容、食品以及饲料等领域。尤其是在美容领域,胶原蛋白具有阻止皮肤中的酪氨酸转化为黑色素的功效,可以起到美容作用。注射用胶原蛋白可以做水光、面部填充以及泪沟填充等,具有较高的疗效,并且副作用少。注射胶原蛋白可以增加肌肤活性,让肌肤更加光泽。胶原蛋白注射治疗过程通常只需20～40分钟,安全性高,对人体无害。

猪胶原蛋白提取^[1]

1 新鲜猪皮的处理

新鲜猪皮，刮去猪毛，去掉污物，60℃左右的热水中洗涤3次，用刀去除皮下脂肪，将处理之后的猪皮切成 1×1cm 的条状，4℃保存。每份猪皮称量 5g，放入锥形瓶中待用。

2 样品脱脂

脱 脂 液 配 制 ：配 制 2.5%，5.0%，7.5%，10%，12.5% 的 脱 脂 液 ，分 别 称 取 2.5g，5.0g，7.5g，10g，12.5g 的 Na2CO3，蒸 馏 水 溶 解 后 ，容 量 瓶 定 容 至100mL。脱脂时，每份样品加入 20mL的蒸馏水，再加入以上 5 种脱脂液，充分搅拌 10min，过滤，按上述步骤再重复一次，清水漂洗两次。每组实验做三组平行。

3 盐处理

盐溶液配制：取 2.25g NaCl，蒸馏水溶解，定容至250mL。样品盐处理条件参照蓝蔚青实验方法。份猪皮加 8.3mL 等渗盐水，放入恒温水浴锅内，在 60℃的条件下分别水浴 0.5h，1.0h，1.5h，2.0h，2.5h，期间不断搅拌，使猪皮受热均匀，用 40℃的蒸馏水漂洗两次。每组实验做三组平行。

4 酸处理

样品酸处理条件参照梁权实验方法。36%醋酸溶液：36.18mL冰醋酸，蒸馏水定容至100mL。NaHSO3溶液：4g NaHSO3溶解于 125mL 蒸馏水中。用 pH 计分别调配 pH 为 2.5，3.0，3.5，4.0，4.5 的醋酸缓冲液。分别用以上5种不同pH值的醋酸缓冲液8.3mL对猪皮进行处理，放入60℃恒温水浴锅中水浴1.5h，期间不断搅拌，使猪皮受热均匀，用 40℃蒸馏水漂洗两次。每组实验做三组平行。

5 冻干

将经过处理的猪皮放入冰箱预冷冻3-4h，放入冷冻干燥机-80℃冷冻干燥 12 小时以上，取出。粉碎、称重。

参考文献

[1]林琳,牛一帆,史振霞,尚校兰,路彦霞,高瑞寒,王碧柔.猪皮中胶原蛋白的提取[J].廊坊师范学院学报(自然科学版),2020,20(01):58-61.

[2]魏春,刘春,刘心雨,张旭初,王欢.基因工程技术生产重组胶原蛋白的 研究进展[J].发酵科技通讯,2021,50(01):1-5.

[3]廖茄利.胶原蛋白能美容抗衰吗[J].家庭医学,2021(01):56.