胰酪大豆胨琼脂对照培养基的应用

背景^[1-3]

胰酪大豆胨琼脂对照培养基是一种通用的营养培养基,用于各种微生物的培养，成分(g/L)：胰酪胨15.0；大豆木瓜蛋白酶消化物5.0；氯化钠5.0；琼脂15.0,pH值7.3±0.2，25℃。

检验原理：胰酪胨（酪蛋白胰酶水解物）、大豆木瓜蛋白酶水解物提供氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂。

用法：称取本品40.0g,加热搅拌溶解于1000ml纯化水中,分装三角瓶,121℃高压灭菌15分钟,备用。

胰酪大豆胨琼脂对照培养基

照品培养基系指按培养基处方特别制备、质量优良的培养基，用于培养基适用性检查。

培养基质量是影响微生物检验结果的重要环节。计数测定用培养基的促生长能力是微生物限度检查结果判断的重要影响因素，控制菌检查用培养基也可能由于其促生长能力、指示能力、抑制能力的差异，从而对菌落颜色、形态等指标存在较大差异，影响结果判断的客观性。

培养基适用性检查是通过检验用培养基与对照培养基的比较，以阳性菌的生长状态或特征来评价拍段检验用培养基是否符合检验要求。

应用^[4][5]

用于枯草芽孢杆菌基于氨基酸次级代谢产物的研究

主要从样品采集、微生物菌株的分离及保存、生物活性筛选、菌株形态、基于16S r DNA的菌株同源性分析、培养条件的优化、前体介导的生物合成实验、次级代谢产物的分离纯化及结构鉴定、生物活性测定等多个方面对分离土壤的枯草芽孢杆菌（TJU01W1）进行了研究。

采集校园土壤样品6份,选择胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA）、营养琼脂（NA）、马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、LA培养基、蔡氏培养基（CZA）等五种固体培养基,采用稀释法和平板法对土壤样品中的微生物进行分离,即首先对土壤样品进行一系列倍数稀释,然后在不同固体培养基表面均匀涂上浓度适宜的土壤样品稀释液。

经过12-36小时培养后,土壤中的单个微生物细胞或孢子可以在培养基表面形成可见的菌落。然后将所需要的菌落通过平板划线法转移到相应的固体培养基上,12-36小时后用显微镜观察其形态确定是否为单一菌株,若不是,再重复上述操作直到得到纯菌株。

通过生物活性实验筛选出一株对产青霉有较强抑制作用的菌株,命名为TJU01W1。其次,将筛选得到的TJU01W1菌株进行冷冻保存,首先将液体培养基、甘油、2 m L离心管、枪头等实验物品用高压灭菌锅在121℃下灭菌20 min;然后将所要保存的菌株接种于相应的液体培养基中,培养至对数生长期（培养系统浑浊度肉眼可见）;将菌悬液与甘油1:1等体积在超净台中混合（最终甘油浓度为50%）,用振荡器震荡均匀;最后将菌株保存于-80℃的冰箱中。

参考文献

[1]Two selenium tolerant Lysinibacillus sp.strains are capable of reducing selenite to elemental Se efficiently under aerobic conditions[J].Ju Zhang,Yue Wang,Zongyuan Shao,Jing Li,Shuting Zan,Shoubiao Zhou,Ruyi Yang.Journal of Environmental Sciences.2019(03)

[2]The modification of natural products for medical use[J].Zongru Guo.Acta Pharmaceutica Sinica B.2017(02)

[3]Methods for in vitro evaluating antimicrobial activity:A review[J].Mounyr Balouiri,Moulay Sadiki,Saad Koraichi Ibnsouda.Journal of Pharmaceutical Analysis.2016(02)

[4]Separation and Purification of Total Phloroglucinols in Dryopteris crassirhizoma with DM-130 Macroporous Adsorption Resin[J].Jin Zhe,Huang Jian-ping,Wang He-meng,Ju han-xun,Ren Si-rui,Chang Ying.Journal of Northeast Agricultural University（English Edition）.2015(02)

[5魏贵香.枯草芽孢杆菌基于氨基酸次级代谢产物的研究[D].天津大学,2019.