氯化硝基四氮唑蓝(NBT)法测定化妆品抗氧化效果

发布日期:2021/8/23 13:49:30

氯化硝基四氮唑蓝 (NBT;N8140-Solarbio): 脱氢酶和其它过氧化酶的底物。用于测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(glucose-6-phosphate dehydrogenase);也是凝血因子I(fibrinogen)的沉淀试剂。也是碱性磷酸酶底物之一，在碱性磷酸酶的催化下生成不溶性的蓝色产物。常用于免疫组化(IHC)、免疫细胞化学(ICC)和蛋白印迹(WB)等实验。NBT可作为一种筛查尿道感染的方法。氯化硝基四氮唑蓝(NBT)还原法对血清糖化低密度脂蛋白及极低密度脂蛋白(SG LP-V P)进行测定，依据呈色的深浅直接用光密度表示SG LP-V P的浓度，并计算SG LP-V P的指数，取得的效果非常好。

氯化硝基四氮唑蓝(NBT)作为一种重要的化学试剂，除在生化实验、临床体外诊断等领域具有重要应用价值外，在化妆品行业也有广泛应用，尤其是在化妆品抗氧化功效检测方面作用重大。

抗氧化是美容护肤界的最热词汇之一，抗氧化剂是化妆品起到抗氧化效果的关键组分，它们可与体内常见的自由基如羟自由基和超氧阴离子自由基等发生反应,防止脂质过氧化,起到祛斑、美白、防皱和抗衰老的功能。利用NBT法测定抗氧化剂活性或测定活性氧的消除率是评价化妆品抗氧化效果的重要参考。

根据已公开报道，韩国三大化妆品公司之一的株式会社在检测旗下化妆品抗氧化功效时用的就是NBT法[1]。在专利CN105267268A中，为了测定抗氧化效果，研发人员用NBT法测定由黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶生成的活性氧，评价检测物消除活性氧的效果，即活性氧消除效果。由黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶生成活性氧。以在波长560nm测定这些活性氧与氯化硝基四氮唑蓝(NBT)反应而生成的蓝色来测定活性氧的消除率。

在化妆品抗氧化剂中，SOD、维生素C、维生素E等都是耳熟能详的名字。SOD，即超氧化物歧化酶，作为抗氧化剂可使化妆品起到延缓肌肤衰老、祛斑的功效，国内外很多化妆品品牌旗下产品都加入了一定比例的 SOD。如法国的雅诗兰黛石榴水、日本的 SKII 神仙水，以及国内大宝 SOD 蜜等。NBT法可测定SOD活性，其原理是氮蓝四唑在蛋氨酸和核黄素存在条件下，照光后发生光化还原反应而生成蓝色甲腙，蓝色甲腙在560nm处有光吸收。SOD能抑制NBT的光化还原，其抑制强度与酶活性在一定范围内成正比。

王丽丽等[2]使用NBT法测定新型化妆品抗氧化剂：DP5-8壳寡糖清除超氧阴离子的能力，并验证了DP5-8壳寡糖较强的抗氧化能力和对羟自由基和超氧阴离子的清除能力。