木本植物用培养基(WPM)的应用

背景^[1-3]

木本植物用培养基(WPM)是1981年由Lloyd和McCown为山月桂茎尖培养专业设计，根据MS培养基改良而来，相对MS培养基而言，使用了硫酸钾替换了KNO3，NH4NO3的含量也降低到了MS培养基的1/4，氮盐也主要以硝酸钙的形式供应。

原理：为植物组织培养提供微量元素、大量元素和维生素；蔗糖为其提供能源；琼脂作为凝固剂。

木本植物用培养基(WPM)

用法：称取本品29.5g于1L蒸馏水或去离子水中，或按需加入其它成分，加热煮沸至完全溶解，调节pH使灭菌后pH5.2±0.1(25℃），分装，115℃高压灭菌30分钟,灭菌结束后请摇匀，以防琼脂沉于底部而凝固，备用。

木本植物在维持生态平衡、荒漠土壤改造及城市居民区绿化等起着很重要的作用，随着植物组织培养技术手段的发展和深入，至今世界上已经有多重木本植物经过离体培养后获得完整植株，有些也已经用于生产实践。

影响木本植物培养的因素有很多，其中培养基是其中最重要的因素。目前应用于木本植物组织培养的主要采用的是低盐培养基，如1/2 MS，B5，WPM。

应用^[4][5]

用于成龄栓皮栎组培繁殖技术的研究

以成龄栓皮栎枝条萌发的幼嫩茎段为材料,研究了组培繁殖过程中无菌苗的建立、基本培养基的筛选、外源激素配比及其浓度、生根培养、愈伤组织诱导分化等,同时对过氧化物同工酶进行了分析。

具体结果如下:（1）外植体的最适采取时间是3月上旬母株萌发的嫩枝;在培养基中添加0.5mg.L-1PVP可有效的抑制初代培养中出现的褐变现象。

（2）在起始培养时,WPM培养基中的外植体萌发率高于BTM、GD的萌发率。培养基中添加6-BA比ZiP效果好。其中0.2mg.L-16-BA对其始外植体茎芽的增殖和生长比较有利,高浓度6-BA（0.4～0.8mg.L-1）对茎芽伸长有一定的负面影响,表现为形态异常,高度愈伤化。

（3）在增殖培养时,培养基中单独添加IAA或与6-BA配合使用均有利于茎芽的增殖和伸长。

（4）采用固—液双相培养基对茎芽的增殖和伸长生长有很明显的促进作用。表现为植株生长健壮,愈伤组织分化率较低,面积较小。

（5）在生根培养中,1/4MS添加20g.l-1蔗糖生根效果。

（6）愈伤组织诱导的最适培养基为1/2MS和WPM,最适培养条件为暗培养。不同外植体对愈伤组织诱导率的影响差异显著,胚、胚根的诱导率明显高于叶片和茎段。KT和2,4-D配合使用较适合不同外植体愈伤组织的诱导。试验中未从愈伤组织诱导出芽、不定根。通过细胞学观察,未发现内生芽器官,仅观察到多核细胞的现象。

（7）不同基因型的POD同工酶谱具有各自的特异性。不同无性系,不同部位,不同培养条件下,B区两条带一直存在,颜色很深,说明编码它们的结构基因在整个周期中始终处于活跃的表达状态,且不受环境条件的影响。

参考文献

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[2]Occurrence of furfuraldehydes during the processing of Quercus suber L.cork.Simultaneous determination of furfural,5-hydroxymethylfurfural and 5-methylfurfural and their relation with cork polysaccharides[J].Silvia Maria Rocha,Manuel A.Coimbra,Ivonne Delgadillo Carbohydrate Polymers:Scientific and Technological Aspects of Industrially Important Polysaccharides.

[3]Cork oak(Quercus suber L.)forest decline in Tunisia:A linkage between physiological adaptation and stress[J].Kwak Myeong Ja,Lee Seong Han,Woo Su Young Scientific Research and Essays.

[4]Habitat fragmentation and the reproductive success of Trillium grandiflorum(Liliaceae)in southern Ontario.[D].Smith,Diane Marie.1998

[5]杨锋利.成龄栓皮栎组培繁殖技术的研究[D].西北农林科技大学,2005.