茶黄素的提取方法

背景及概述^[1]

茶黄素(theaflavins，TFs)是在红茶发酵过程中茶多酚物质氧化形成的主要色素 物质，其中茶黄素、其中茶黄素(TF1)、茶黄素-3-没食子酸酯(TF2A)、茶黄素-3＇-没食子酸 酯(TF2B)和茶黄素-3，3＇-双没食子酸酯(TF3)是4种最主要的茶黄素。茶黄素不仅是红茶滋 味和汤色最重要的影响因子，而且具有治疗心血管系统疾病、抗炎、抗氧化、抗病毒、增强免 疫力、降血糖、抗肿瘤等多种药理功效，是一类极具开发潜力的产物。

提取方法^[1-2]

报道一、

(1)选用英红九号红茶为原料，粉碎后过60目筛，按固液比(w/v)为1:10加入50％ 的乙醇溶液，回流提取3次，合并提取液并旋转浓缩至无乙醇；

(2)采用乙酸乙酯对红茶浓缩提取液进行萃取，红茶浓缩提取液和乙酸乙酯的体 积比为1:1，萃取次数为3次，合并乙酸乙酯萃取液并旋转浓缩除去乙酸乙酯，冷冻干燥得到 乙酸乙酯层提取物；

(3)取乙酸乙酯层提取物用80％甲醇溶液(用乙酸调节pH值为3.5)溶解，通过MCl 反相色谱填料短柱脱除叶绿素后用80％甲醇溶液(pH值为3.5)洗脱至无红色，收集洗脱液 并浓缩干燥得到脱色茶黄素粗品；

(4)取脱色茶黄素粗品，甲醇溶解样品后，采用干法拌硅胶，装硅胶柱后，以乙酸乙 酯(含2％乙酸)进行洗脱，通过液相色谱检测收集茶黄素段的洗脱液，收集合并洗脱液并浓 缩干燥得到茶黄素粗品；

(5)取茶黄素粗品，用40％甲醇溶液(含0.1％乙酸)溶解样品后，采用MCl反相色谱 柱以40％甲醇溶液(含0.1％乙酸)洗脱除去前杂，再用60％甲醇溶液(含0.1％乙酸)洗脱， 收集茶黄素段的洗脱液，合并茶黄素段洗脱液并浓缩干燥得到纯化茶黄素；

(6)取纯化过的茶黄素样品用30％甲醇溶液(含0.1％乙酸)溶解样品后，采用C18 反相色谱柱，以30％甲醇溶液(含0.1％乙酸)进行洗脱，除去前杂，再用50％甲醇溶液(含 0.1％乙酸)进行洗脱，收集茶黄素段的洗脱液，合并茶黄素段洗脱液，合并茶黄素段洗脱液 并浓缩干燥得到高纯度英红九号红茶茶黄素。

报道二、

(1)按提取茶多酚的工艺制备得到700kg富含80mg/ml茶多酚的乙酸乙酯溶液；

(2)将700kg富含茶多酚的乙酸乙酯溶液和800kg粉碎的茶鲜叶投入氧化发酵罐内，依次加入20L乙酸乙酯和1.5L的柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲剂，在常温状态下，通入空气搅拌氧化发酵30-40分钟，得茶黄素酯相溶液；

(3)茶黄素酯相溶液先经过滤除去茶渣，再进行浓缩后用碳酸氢钠溶液洗杂，洗杂后得到水相溶液和酯相溶液；茶渣烘干，另存备用。

(4)步骤(3)的水相溶液浓缩后喷雾干燥，得到低规格的茶黄素干粉；

(5)步骤(3)的酯相溶液浓缩以回收乙酸乙酯，然后加入水使茶黄素转溶到水中；

(6)转溶后的茶黄素水溶液进行离心过滤，除去固态杂质，得到纯净的茶黄素溶液；

(7)将茶黄素溶液浓缩到固含量20-30％，然后喷雾干燥即得到高规格的茶黄素干粉产品。

经检测计算，茶黄素干粉产品的纯度为55.6％，收率为54％(以茶多酚计)。

参考文献

[1] [中国发明,中国发明授权] CN201610574681.1 一种从红茶中提取茶黄素的方法

[2] [中国发明,中国发明授权] CN200910153520.5 一种茶黄素的产业化制备方法