大鼠胰岛素细胞的应用

背景^[1-3]

大鼠胰岛素细胞源自大鼠胰岛组织，胰岛素阳性，可合成胰岛素原I和II，可用于胰岛β细胞功能研究。

胰腺的内分泌部分，是分散在胰腺中的不规则的细胞群。胰岛至少有三种细胞：A(或a2)细胞分泌胰高血糖素；B(或β)细胞分泌胰岛素；近来又发现一种细胞，称为D(或δ或α1)细胞，它在正常情况下分泌生长激素释放抑制激素。D细胞增生或发生肿瘤时，分泌大量胃泌素，称为胃泌素瘤。可引起胃酸分泌过多的消化性溃疡。胰岛这些细胞紧靠在毛细血管上，所分泌的激素，通过毛细血管壁渗入血液内，有调节糖代谢的作用。

大鼠胰岛素细胞

B细胞(β细胞)，约占胰岛细胞的60%～80%，分泌胰岛素，胰岛素可以降低血糖。缺乏胰岛B细胞将导致糖尿病的发生。

A细胞(α细胞)，约占胰岛细胞的24%～40%，分泌胰高血糖素，胰高血糖素作用同胰岛素相反，可增高血糖。

D细胞(δ细胞)，约占胰岛细胞总数的6%～15%，分泌生长抑素。

胰高血糖素是一种由胰岛细胞分泌的蛋白质激素，它与胰岛素一起发挥作用来调节血糖的水平。当血糖（葡萄糖）浓度低时，胰高血糖素刺激肝脏将储存的糖原转化为葡萄糖，并立即释放到血流中，以此来升高血糖的浓度。胰高血糖素还可以增加肝脏中蛋白质生成葡萄糖的速率。

应用^[4][5]

用于MicroRNA-126对大鼠胰岛β细胞胰岛素信号通路的调控作用及机制研究

探讨mi R-126在原代分离培养的正常SD大鼠胰岛β细胞胰岛素信号通路中的调控作用及其对胰岛β细胞凋亡的影响。

方法:以原代分离培养的正常SD大鼠胰岛β细胞为模型,转染合成的mi R-126模拟物（mi R-126 mimic）或mi R-126抑制剂（mi R-126 inhibitor）,干预mi R-126的表达,并用流式细胞术检测转染效率和细胞凋亡率。

转染后的大鼠胰岛β细胞用胰岛素（100nm）刺激12小时,提取细胞的总RNA,用荧光定量PCR技术以U6及β-actin为内参基因检测mi R-126、IRS-1、IRS-2的相对表达量;提取细胞总蛋白进行BCA蛋白测定,用western Blot技术检测IRS-1/2,Akt,PIK3R2蛋白表达量。

结果:流式细胞术检测显示:mi R-126 mimics、mi R-126 inhibitor、negative control转染效率较高;mi R-126 mimic组大鼠胰岛β细胞凋亡数显著高于NC组和mi R-126inhibitor组（P<0.05）;荧光定量PCR检测结果显示:mi R-126 mimic组大鼠胰岛β细胞IRS-1/2相对表达量较NC组和mi R-126 inhibitor组显著降低（P<0.05）;Western blot结果显示:mi R-126 mimic组大鼠胰岛β细胞IRS-1/2、Akt、P-Akt及PIK3R2蛋白表显著受到抑制。

结论:过表达mi R-126可能通过调控胰岛素信号通路中IRS-1/2、Akt、P-Akt及PIK3R2表达参与胰岛素抵抗。2.过表达mi R-126可诱导大鼠胰岛β细胞凋亡。

参考文献

[1]Proteome of the insulin-secreting Min6 cell porosome complex:Involvement of Hsp90 in its assembly and function[J].Amulya Rajagopal,Sanjana Kulkarni,Kenneth T.Lewis,Xuequn Chen,Abir Maarouf,Christopher V.Kelly,Douglas J.Taatjes,Bhanu P.Jena.Journal of Proteomics.2015

[2]A dicer-miR-107 interaction regulates biogenesis of specific miRNAs crucial for neurogenesis[J].Emma Ristori,Miguel Alejandro Lopez-Ramirez,Anand Narayanan,Guillermina Hill-Teran,Albertomaria Moro,Charles-Felix Calvo,Jean Leon Thomas,Stefania Nicoli.Developmental Cell.2014

[3]Rfx6 Maintains the Functional Identity of Adult PancreaticβCells[J].Julie Piccand,Perrine Strasser,David J.Hodson,Aline Meunier,Tao Ye,Céline Keime,Marie-Christine Birling,Guy A.Rutter,Gérard Gradwohl.Cell Reports.2014(6)

[4]Magnetic bead assisted labeling of antibodies at nanogram scale[J].Mahya Dezfouli,Sanja Vickovic,Maria Jesus Iglesias,Peter Nilsson,Jochen M.Schwenk,Afshin Ahmadian.Proteomics.2014(1)

[5]王玉琢.MicroRNA-126对大鼠胰岛β细胞胰岛素信号通路的调控作用及机制[D].宁夏医科大学,2015.