展青霉素检测方法对比分析

一.什么是展青霉素

展青霉素（Patulin,PTL)又称展青霉毒素、棒曲霉素、珊瑚青霉毒素，是一种有毒的真菌代谢产物,其具有广谱的抗生素特点。然而，由于它的毒性作用，研究人员已不再继续其作为治疗用途药物的研究。

二.主要危害、来源及传播途径

毒理学试验表明，展青霉素对人及动物均具有较强的毒性作用，具有影响生育、致癌和免疫等毒理作用，同时也是一种神经毒素。

展青霉素首先在霉烂苹果和苹果汁中发现，主要污染水果及其制品,尤其是苹果、山楂、梨、番茄、苹果汁和山楂片等[1]。另外展青霉素的污染情况还存在于一些中药材(红枣、杏仁和木瓜等)中 [2]。

三.检测方法

展青霉素易溶于水、氯仿、丙酮、乙醇及乙酸乙酯等有机溶剂，微溶于乙醚、苯，不溶于石油醚。在酸性环境中展青霉素非常稳定，在碱性条件下活性降低，具有不饱和内酯的某些特性,易与含巯基( —S H )化合物反应。检测方法主要有薄层色谱法（TLC）气相色谱法（GC）高效液相色谱法（HPLC）酶联免疫吸附法（ELISA）高效液相色谱质谱联用[1]。样品提取溶剂主要是乙酸乙酯和乙腈与水的混合液。提取液的纯化主要采用无水碳酸钠、C18固相萃取柱、亲水亲脂平衡柱、串联PVPP-C18柱和My-cosep多功能柱等净化方法[3]。 

薄层色谱法

薄层色谱法(thin-layerchromatography,TLC)是最早建立的一种展青霉素检测方法,具有简便、经济、设备简单等特点。但其灵敏度稍差,且如果有酚类成分斑点干扰大,近年来应用较少[3]。

GB/T5009.185-2003《苹果和山楂制品中展青霉素的测定》便利用此原理，试样中展青霉素经提取、净化、浓缩、薄层展开后，利用薄层扫描仪进行紫外反射光扫描定量,此方法检出限为3μg/L。

高效液相色谱法

高效液相色谱法(HPLC)具有灵敏度高、选择性好、准确性和精确性等优点,近年来被越来越广泛的应用于展青霉素的含量测定[3]。

NY/T1650-2008《苹果及山楂制品中展青霉素的测定 高效液相色谱法》用乙腈提取试样中的展青霉素，提取液经净化柱净化后，用高效液相色谱柱分离，以紫外检测器于276nm处检测，外标法定量。液体样品检出限为8μg/L、固液及固体样品检出限为12μg/L。

液相色谱-质谱/质谱法

液相色谱-质谱/质谱法具有广适性检测器，具有分离能力强、检测线低、灵敏度高等优点，对于色谱上没有完全分离开的样品，但通过MS的特征离子质量色谱图也能分别画出它们各自的色谱图来进行定性定量。

SN/T 2534-2010 《进出口水果和蔬菜制品中展青霉素含量检测方法  液相色谱-质谱/质谱法与高效液相色谱法》中的质谱法，针对不同的样品，用乙腈稀释样品后直接固相萃取净化或者用乙酸乙酯提取试样中的展青霉素，吹干浓缩后固相萃取净化，用液相色谱-质谱／质谱测定，外标法定量。此方法测定低限为5μg/kg。

四.预防措施

食用新鲜果蔬时，如果发现有霉变现象，不食用。曾有实验证明，部分霉烂的水果其未霉烂部分仍能检测出展青霉素，含量最高为霉变部位的一半。因此，即使苹果烂一点，也要全部扔掉。在选择果蔬制品（如果蔬汁、果酒等）时，尽量于正规场所购买。

参考文献

1.李红光； 陈艳； 任磊《果汁中展青霉素的高效液相色谱测定法》职业与健康，Occupation and Health, 2006年14期；

2.王娅芳； 刘利亚； 黄培林《展青霉素检测方法及污染情况的研究进展》现代预防医学 , Modern Preventive Medicine，2012年19期；

3.周玉春； 杨美华； 许军《展青霉素的研究进展》贵州农业科学，Guizhou Agricultural Sciences， 2010年02期。