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JEKO-1人套细胞淋巴瘤细胞的应用

发布日期:2021/5/14 9:30:12

背景[1-3]

JEKO-1人套细胞淋巴瘤细胞来源于一位套细胞淋巴瘤患者的巨细胞变种白血病病变,从其外周血单核细胞中建立了MCL细胞株JeKo-1。JeKo-1细胞EB病毒阴性,并表达一种B细胞表型的IgM。JeKo-1细胞过表达cyclin D1、Bcl-2、c-Myc及Rb蛋白。Bcl-1/J(H)基因重排得到了PCR证实,JeKo-1细胞在SCID小鼠中高成瘤。

血液病理学家根据形态学发现和该肿瘤是B细胞淋巴瘤,作出套细胞淋巴瘤的正确诊断。正如淋巴瘤其他亚型一样,合适的活检是重要的。套细胞淋巴瘤鉴别诊断包括其他小细胞B细胞淋巴瘤。特别套细胞淋巴瘤和小淋巴细胞淋巴瘤都有特征性CD5表达。套细胞淋巴瘤常略有锯齿状的核。

JEKO-1人套细胞淋巴瘤细胞

套细胞淋巴瘤占全部非霍奇金淋巴瘤(NHL)的6%。这类淋巴瘤以前归在其他亚型中,只有最近十余年才被认识到是一类独立疾病。认识到这些淋巴瘤有特征性染色体移位t(11;14)即第14号染色体上免疫球蛋白重链基因和第11号染色体上Bcl-1基因之间移位,有规律地过度表达Bcl-1蛋白,最具特点的是过度表达Cyclin D1,故肯定了该类淋巴瘤的存在。

应用[4][5]

用于特异性抑制β-catenin活性对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株增殖、凋亡的研究

研究β-catenin和p-GSK-3β在套细胞淋巴瘤的表达及意义,并特异性抑制β-catenin观察对套细胞淋巴瘤细胞的增殖和凋亡的影响;

【方法】免疫组织化学方法检测β-catenin蛋白、p-GSK-3β蛋白在套细胞淋巴瘤中的表达差异。应用短发夹人β-catenin的基因sh RNA经LipofectamineTM2000脂质体转染Jeko-1细胞;RT-PCR、Western blot的方法鉴定干扰效果。应用四唑盐(MTT)法绘制细胞生长曲线,流式细胞术分析细胞调亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Cyclin D1、C-myc、caspase3表达水平的变化。

【结果】β-catenin套细胞淋巴瘤异常表达明显升高为73.33%(22/30),对照组仅6.7%(2/30),有显著性差异,p<0.05;p-GSK-3β在套细胞淋巴瘤阳性率为66.67%(20/30),显著高于对照组16.67%(5/30),p<0.05。

Spearman相关分析发现,二者存在明显的正相关,r=0.852,p<0.01。β-catenin sh RNA转染Jeko-1细胞48h后,RT-PCR、Western blot检测发现β-catenin的m RNA和蛋白表达下降。

细胞增殖率为(45.37±3.16)%,明显低于对照组(94.41±2.46)%、(98.21±0.39)%,p<0.05;细胞凋亡率为(39.46±3.82)%、高于对照组(4.37±1.57)%、(3.26±1.26)%,p<0.05。同时凋亡相关蛋白Bcl-2、Cyclin D1、C-myc的表达下降,而Bax、caspase3表达上升。

β-catenin特异性抑制剂XAV939能浓度依赖性抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡,p<0.05。

【结论】套细胞淋巴瘤存在β-catenin、p-GSK-3β蛋白的异常表达,提示可能与套细胞淋巴瘤的发生有关。β-catenin sh RNA真核表达载体,可以有效地干扰Jeko-1细胞中β-catenin基因的表达,抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡。XAV939亦可以抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡。特异性抑制β-catenin活性可能可以作为套细胞淋巴瘤治疗的一个新的思路。

参考文献

[1]Teashirt is required for transcriptional repression mediated by high Wingless levels.Waltzer L,Vandel L,Bienz M.EMBO Journal.2001

[2]Frequent beta-catenin overexpression without exon 3 mutation in cutaneous lymphomas.Bellei Barbara,Pacchiarotti Alberto,Perez Marie,Faraggiana Tullio.Modern pathology:an official journal of the United States and Canadian Academy of Pathology,Inc.2004

[3]The roles of APC and Axin derived from experimental and theoretical analysis of the Wnt pathway.Lee Ethan,Salic Adrian,Krüger Roland,Heinrich Reinhart,Kirschner Marc W.Plos Biology.2003

[4]Beta-catenin hits chromatin:regulation of Wnt target gene activation.Mosimann Christian,Hausmann George,Basler Konrad.Nature reviews.Molecular cell biology.2009

[5]何金水.特异性抑制β-catenin活性对套细胞淋巴瘤Jeko-1细胞株增殖、凋亡的研究[D].福建医科大学,2015.

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