人脑星形胶质瘤细胞系的应用

背景^[1-3]

人脑星形胶质瘤细胞系是取人脑星形细胞瘤手术组织,经剪切、消化后,培养、传代并鉴定后的成熟贴壁，成纤维细胞系，主要用于脑星形胶质瘤细胞的体外研究。

纤维性星形胶质细胞(fibrous astrocyte)多分布在脑脊髓的皮质，突起细长，分支较少，胞质中含大量胶质丝，又称蜘蛛细胞(spider cell)；原浆性星形胶质细胞(protoplasmic astrocyte)，多分布在灰质，细胞突起粗短，分支多。胞质内胶质丝较少，又称苔状细胞(mossycell)。电镜下星形胶质细胞的胞核有缺刻，胞质较清亮，游离核糖核蛋白体和粗面内质网均很少，糖原颗粒丰富，有大量的胶质丝。

纤维形星形胶质细胞的突起呈长圆柱形，而原浆性星形胶质细胞的突起呈薄片状，并常包裹着神经细胞及其突触(不伸人突触间隙)。星形胶质细胞的脚板与血管内皮细胞之间相隔一层基板，脚板质膜与基板接触处有半桥粒结构。

人脑星形胶质瘤细胞

使用方法：

1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶保存，收到细胞后，拆开包装T25瓶的自封袋，不拆封口膜，表面喷75%酒精消毒。

2、消毒后用显微镜观察细胞状态，并拍下细胞照片。

3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上，平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。

4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用离心管装好备用。

5、如细胞密度高于80%，可以直接消化传代，相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。

应用^[4][5]

用于人脑星形细胞瘤细胞体外化疗药物敏感性实验研究

应用偶氮噻唑蓝比色法（MTT）,检测常用化疗药物卡莫司丁（BCNU）、替尼泊甙（VM26）、多柔比星（ADM）、顺铂（CDDP）、环磷酰胺（CTX）单用及联合应用对人脑星形细胞瘤（AT）细胞的敏感性,比较不同类型（高分级,低分级,原发,复发）星形细胞瘤细胞对化疗药物敏感性的差别,以期对AT术后化疗,提供合理、个性化的用药依据。

方法:44例不同类型人脑星形细胞瘤细胞（术后病理证实为AT）,在CO2培养体系中进行体外原代培养,差速贴壁法将其分离纯化,应用免疫荧光技术检测脑胶质纤维酸性蛋白（GFAP）对其鉴定;在分离纯化鉴定后的AT细胞中,加入不同浓度的化疗药物进行干预,MTT法测光密度值（OD值）,计算敏感率。

结果:1.38例AT标本成功进行了体外培养,培养成功率86%,高分级AT培养成功率最高;

2. 五种药物对AT细胞的抑制范围差异性很大,敏感性均不同；

3. 不同作用机制的药物联合应用对AT的敏感率高于其单一药物,二者（单用、联合）间有显著性差异（p<0.01）;

4.单一药物对高分级及复发AT细胞的敏感率均高于低分级及原发AT细胞,二者间（高分级与低分级间,原发与复发间）差异有统计学意义（p<0.05）,而联合用药时,高分级与低分级之间无差异性（p>0.05）,原发与复发之间也无差异性（p>0.05）。

参考文献

[1]Efficacy of temozolomide as adjuvant chemotherapy after postsurgical radiotherapy alone for glioblastomas[J].Deok-Joo Rhee,Doo-Sik Kong,Won Seog Kim,Kwon-Byong Park,Jung-Il Lee,Yeon-Lim Suh,Sang Young Song,Sung Tae Kim,Do-Hoon Lim,Kwan Park,Jong Hyun Kim,Do-Hyun Nam.Clinical Neurology and Neurosurgery.2009(9)

[2]Temozolomide in malignant gliomas:current use and future targets[J].J.Lee Villano,Tara E.Seery,Linda R.Bressler.Cancer Chemotherapy and Pharmacology.2009(4)

[3]Incidence of early pseudo‐progression in a cohort of malignant glioma patients treated with chemoirradiation with temozolomide[J].WalterTaal,DietaBrandsma,Hein G.de Bruin,Jacoline E.Bromberg,Annemarie T.Swaak‐Kragten,Peter A.E.Sillevis Smitt,Corine A.van Es,Martin J.van den Bent.Cancer.2008(2)

[4]Present Trend in the Primary Treatment of Aggressive Malignant Glioma:Glioblastoma Multiforme[J].Tariq Parvez.Technology in Cancer Research&Treatment.2008(3)

[5]苏国军.人脑星形细胞瘤细胞体外化疗药物敏感性实验研究[D].桂林医学院,2010.