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细胞苏木素染色试剂盒的应用

发布日期:2021/4/25 9:03:53

背景[1-3]

细胞苏木素染色试剂盒采用苏木素染色液进行免疫染色后的复染,操作步骤简便,操作时间短。可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色,或与免疫组织化学、免疫细胞化学、免疫荧光、原位杂交等配合使用。使用苏木素染色试剂盒,染色后可以进行免疫染色或其它染料的复染。苏木素染色后的细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。染色液也可以重复使用,直至认为效果不佳时再换用新的染色液。

细胞苏木素染色图

苏木精(HE)是从热带豆科植物苏木的干枝中提取的一种色素,是组织化学和免疫组织化学中最常用的染料之一。苏木精不能直接染色,必须暴露在空气中变成氧化苏木精(又叫苏木素)-成熟后才能使用。苏木精的成熟过程需时较长,配制后时间愈久,染色力愈强。

伊红为酸性染料,主要将细胞质和细胞外基质中的成分着粉红色或者红色;苏木素为碱性染液,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色。伊红与苏木素在色泽上形成明显色差,使组织和细胞形态结构清晰地显示出来,形成红蓝相映的图像,成为经典的HE染色法。HE染色法是组织学、胚胎学、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

应用[4][5]

用于整块组织苏木精—伊红染色制片法与传统切片片染制作法比较的研究

传统石蜡组织切片片染制作法有一些弊端和局限性,如每次制作的数量少、制作周期长、耗费制作者较多的时间和精力,不适宜大批量教学切片制作需要。整块组织H.E染色切片制作法是近年来新出现的一种制片方法。

通过实验,利用自行配制的染液,即苏木素染色剂15mg、蒸馏水40mL、钾明矾600mg、碘酸钠5mg配制成苏木素染液;伊红染液用伊红R或B250mg、95%酒精50mL、蒸馏水50mL、冰醋酸少许配制成伊红染液,然后经过固定、浸洗、染苏木素液、浸洗分色、蓝化、梯度浓度酒精脱水、染复制伊红、盐酸酒精分色、纯酒精脱水、二甲苯透明、石蜡组织包埋、切片等一系列过程制作切片。

此法制成的切片染色效果更加均匀,色彩更加亮丽。通过实验发现整块组织制作的切片染色效果在有些方面要优于传统制作法,且在制作程序上大大简化,可以为制作者节省大量的时间及精力,对大批量教学科研石蜡组织切片的制作较为适宜,适合于大批量平行制作。

参考文献

[1]Single-cell Wnt signaling niches maintain stemness of alveolar type 2 cells[J].Ahmad N.Nabhan,Douglas G.Brownfield,Pehr B.Harbury,Mark A.Krasnow,Tushar J.Desai.Science.2018(6380)

[2]Epithelial WNT Ligands Are Essential Drivers of Intestinal Stem Cell Activation[J].Winnie Y.Zou,Sarah E.Blutt,Xi-Lei Zeng,Min-Shan Chen,Yuan-Hung Lo,David Castillo-Azofeifa,Ophir D.Klein,Noah F.Shroyer,Mark Donowitz,Mary K.Estes.Cell Reports.2018(4)

[3]Myeloid-derived suppressor cells are increased and correlated with type2 immune responses,malnutrition,inflammation,and poor prognosis in patientswith breast cancer[J].Kenji Gonda,Masahiko Shibata,Tohru Ohtake,Yoshiko Matsumoto,Kazunoshin Tachibana,Noriko Abe,Hitoshi Ohto,Kenichi Sakurai,Seiichi Takenoshita.Oncology Letters.2017(2)

[4]Cancer statistics in China,2015[J].Wanqing Chen,Rongshou Zheng,Peter D.Baade,Siwei Zhang,Hongmei Zeng,Freddie Bray,Ahmedin Jemal,Xue Qin Yu,Jie He.CA:A Cancer Journal for Clinicians.2016(2)

[5]蒙兆年.整块组织苏木精—伊红染色制片法与传统切片片染制作法比较的研究[D].兰州大学,2014.

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