人淋巴母细胞的应用

背景^[1-3]

人淋巴母细胞是处于增殖状态的淋巴细胞，其体积增大，RNA和蛋白质合成率增高，受抗原刺激后，可发生活化、增殖和分化成淋巴细胞。

淋巴细胞（lymphocyte）是白细胞的一种，是体积最小的白细胞。其由淋巴器官产生，主要存在于淋巴管中循环的淋巴液中，是机体免疫应答功能的重要细胞成分，是淋巴系统几乎全部免疫功能的主要执行者，是对抗外界感染和监控体内细胞变异的一线“士兵”。

人淋巴母细胞

淋巴细胞是一类具有免疫识别功能的细胞系，按其发生迁移、表面分子和功能的不同，可分为T淋巴细胞（又名T细胞）、B淋巴细胞（又名B细胞）和自然杀伤(NK)细胞。T细胞和B细胞都是抗原特异性淋巴细胞，它们的最初来源是相同的，都来自造血组织。

淋巴细胞是免疫反应的核心。根据淋巴细胞的发生来源、形态结构、表面标志和免疫功能等方面的不同，可分为T细胞、B细胞和NK细胞三类。

T淋巴细胞随血循环到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B细胞在骨髓中分化成熟。

当受抗原刺激后，T淋巴细胞即转化为淋巴母细胞，再分化为致敏T淋巴细胞，参与细胞免疫，其免疫功能主要是抗胞内感染、瘤细胞与异体细胞等；而B淋巴细胞是先转化为浆母细胞，再分化为浆细胞，产生并分泌免疫球蛋白（抗体），参与体液免疫，其功能是产生抗体，提呈抗原，以及分泌细胞内因子参与免疫调节；NK细胞不依赖抗原刺激而自发地发挥细胞毒效应，具有杀伤靶细胞的作用。

应用^[4][5]

用于EB病毒转化淋巴母细胞中相关基因表达的检测与分析研究

研究EB病毒诱导淋巴细胞转化的分子机制提供实验依据。

方法：从5例健康成人外周静脉血中分离出淋巴细胞，在体外利用EBV诱导B淋巴细胞转化建立永生化的淋巴母细胞系。提取转化淋巴母细胞及其配对的健康人淋巴细胞的总RNA和总蛋白，应用实时定量PCR和Western blot方法，分别检测E2F1、PLK1、BIRC5及PTPN11基因在5例转化淋巴母细胞及其匹配的健康人淋巴细胞中的表达情况。

结果：成功建立EBV转化的淋巴母细胞系，得到了5例健康人转化淋巴母细胞，检测了E2F1、PLK1、BIRC5及PTPN11基因在5例转化的淋巴母细胞及其配对的健康人淋巴细胞中的表达情况。E2F1基因在两种细胞中均表达，与正常人淋巴细胞相比，转化细胞中E2F1的mRNA表达上调3.161倍，差异有统计学意义（P<0.05）；

Western blot结果显示，与正常人淋巴细胞相比，E2F1在转化细胞中的蛋白表达上调1.850倍，差异有统计学意义（P<0.05）。

PLK1基因在两种细胞中均表达，与正常人淋巴细胞相比，淋巴母细胞中PLK1的mRNA表达上调11.329倍，差异有统计学意义（P<0.001）；

Western blot结果显示，与正常人淋巴细胞相比，PLK1在转化细胞中的蛋白表达上调8.140倍，差异有统计学意义（P<0.001）。

BIRC5基因在两种细胞中均表达，相比正常人淋巴细胞，淋巴母细胞中BIRC5的mRNA表达上调7.921倍，差异有统计学意义（P<0.001）；

Western blot结果显示，与正常人淋巴细胞相比，BIRC5在转化细胞中的蛋白表达上调2.065倍，差异有统计学意义（P<0.01）。

参考文献

[1]Targeting survivin overcomes drug resistance in acute lymphoblastic leukemia.Park E,Gang EJ,Hsieh YTet al.Blood.2011

[2]Epstein-Barr virus infection.Cohen J I.The New England Quarterly.2000

[3]The proto-oncogene c-myc is a direct target gene of Epstein-Barr virus nuclear antigen 2.Kaiser C,Laux G,Eick D,et al.Journal of Virology.1999

[4]MALT lymphomas:pathogenesis can drive treatment.Bertoni F,Coiffier B,Salles G,Stathis A,Traverse-Glehen A,Thieblemont C,Zucca E.Oncology（Williston Park）.2011

[5]付婷.EB病毒转化淋巴母细胞中相关基因表达的检测与分析[D].南华大学,2013.