细胞培养服务的应用

背景^[1-3]

细胞培养服务是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术，结合筛选驯化的高表达细胞株和个性化细胞培养基，控制细胞培养过程，实现提高生产效率及产品质量、降低生产成本的目的，是当前国际上生物制品生产的主流模式。

细胞培养服务包括：

微载体培养

广泛应用于生产疫苗、基因工程产品等，兼具悬浮培养和贴壁培养的优点。远睿生物以该技术应用于培养各类型细胞，如293细胞、成肌细胞、vero细胞、CHO细胞等各类铁壁细胞，其中293细胞、vero细胞已经用于兽用疫苗的中试生产。

悬浮细胞培养

悬浮细胞培养技术由于其传代方便、物质交换充分、利于生产工艺放大等优点广泛用于各类生物制品的生产。远睿生物目前已经成功的将CHO细胞悬浮工艺的放大到750L生产规模，凭借对CHO、293等细胞的从筛选到驯化，从小试到生产规模的悬浮培养技术的掌握，高效为客户提供CHO类、293等细胞的筛选、驯化、工艺开发、样品制备等专业服务。

悬浮细胞培养

无血清/低血清培养

由于血清成分的复杂性及批次间质量稳定性差等缺点，在细胞培养过程中面临很多技术问题。远睿生物成功发现血清替代物，成功的实现了多种贴壁细胞在低血清（0.1%）或无血清状态下实现长期传代培养。为客户提供表皮细胞、成纤维细胞、293A类细胞等的无血清/低血清培养服务。

腺病毒扩增/规模化生产

腺病毒的优点在于包装量比较大，宿主范围广对人致病性低，外源基因不会插入细胞基因组内等优点，目前被越来越多的科学家青睐，用于制备各类生物制品。远睿生物利用293细胞生产腺病毒，病毒产量能够达到1013 vp/mL，病毒比活大5%以上。

应用^[4][5]

用于大黄素等中药单体对HT-29细胞TLR4表达及MAPKs信号通路的影响研究

溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis,UC）,又称慢性非特异性溃疡性结肠炎或特发性溃疡性结肠炎,是一种原因不明的慢性肠道炎症性疾病,与克隆氏病统称炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease,IBD）。

由于发病率呈上升趋势,发病人群以青、壮年多见,成为严重影响健康的消化道疾病之一,因此,其发病机制和治疗方法一直是全球医学界的研究重点。尽管IBD的发病机制不十分明了,但现有研究表明与遗传、环境、感染及免疫等多因素相关。

选择了大黄素等中药单体对HT-29细胞TLR4表达及MAPKs信号通路的影响,尝试进一步探讨IBD的病理机制和中药的作用环节。TLR最初是在果蝇体内发现的一种负责信号转导的跨膜受体,随着研究的深入,根据其同源结构域,人们发现在哺乳动物存在着由多种Toll受体构成的Toll受体家族（TLRs）,共有12种。TLRs是生物经过数百万年进化后保留下来的宿主防御机制,通过对病原微生物的识别,直接启动抗感染机制。

研究较为清楚的有TLR2和TLR4,分别识别肽聚糖和脂多糖等,激活转录因子NF-κB,诱导细胞因子和防御素（Defensin）的表达,以及介导炎症介质的释放等。肠道粘膜上皮细胞也广泛表达Toll受体,然而,正常情况下,肠道粘膜上皮细胞的TLR对肠道常驻微生物及其产物呈低反应状态。

参考文献

[1]The enhancement of cancer stem cell properties of MCF-7 cells in 3D collagen scaffolds for modeling of cancer and anti-cancer drugs.Chen,Lei,Xiao,Zhifeng,Meng,Yue,Zhao,Yannan,Han,Jin,Su,Guannan,Chen,Bing,Dai,Jianwu.Biomaterials.2012

[2]Cell-Cell Adhesion and Cytoskeleton Tension Oppose Each Other in Regulating Tumor Cell Aggregation.Saias L,Gomes A,Cazales M,Ducommun B,Lobjois V.Cancer Research.2015

[3]Semiautomatic growth analysis of multicellular tumor spheroids.Rodday Bjoern,Hirschhaeuser Franziska,Walenta Stefan,Mueller-Klieser Wolfgang.Journal of biomolecular screening.2011

[4]CD133 is a marker of bioenergetic stress in human glioma.Griguer Corinne E,Oliva Claudia R,Gobin Eric,Marcorelles Pascale,Benos Dale J,Lancaster Jack R,Gillespie G Yancey.PloS one.2008

[5]周联.大黄素等中药单体对HT-29细胞TLR4表达及MAPKs信号通路的影响[D].广州中医药大学,2006.