上皮细胞生长因子的应用

背景^[1-3]

上皮细胞生长因子指在组织培养中，除了氨基酸、维生素、葡萄糖以及无机盐等正常成分之外，可以代替培养基血清高分子物质的而促进细胞生长的物质。

生长因子多为广义的肽激素，有胰岛素、表皮生长因素（EGF）、成纤细胞生长因素（fibroblast growth factor，FGF）、血小板来源增殖因素（platelet－derivedgrowth factor，PDGF）以及生长激素释放抑制因子（somatostatin=SRIH）等。在肽激素之外，皮质醇和甲状腺素（T3）等也属于生长因子。

上皮细胞生长因子结构图

EGF是人体内存在的一种生长因子，它的主要功能是促进皮肤细胞的分裂。研究表明：极微量的EGF能强烈刺激细胞生长，抑制衰老基因表达，阻止皮肤衰老，使皮肤各组成份保持生理状态。

EGF能促进上皮细胞、成纤维细胞的增殖；增强表皮细胞的活力；延缓表皮细胞的老化，使肌肤各组成成份保持生理状态。高活性的EGF才能促进皮肤细胞的分裂和生长，此外它还能刺激细胞外一些大分子（如透明质酸和胶原白等）的合成与分泌。

重组人表皮生长因子（rh-EGF），大量存在于人体上皮细胞内，它可刺激上皮细胞和内皮细胞生长，使新的表皮细胞不断长成，将死皮层推动并逐渐脱落，保持肌肤细嫩光滑。同时促进皮肤各种细胞的新陈代谢，增强细胞吸收营养物质。

应用^[4][5]

用于调控HIF-1α对鼻黏膜上皮细胞生长因子表达的影响研究

用短发夹RNA（shRNA）特异性沉默人鼻黏膜上皮细胞（human nasal epithelial cells,HNEC）缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1αHIF-1α）,观察其对HNEC表达血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、转化生长因子（transforming growth factor,TGF）β1、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF/fibroblast growth factor-2,FGF-2）三种生长因子的影响。

方法：取因鼾症行下鼻甲切除术患者的下鼻甲黏膜,体外培养原代细胞,体外设计合成以腺病毒为载体GFP标记的shRNA（包括ad-HIF shRNA及ad-HIF shRNA-neg）.将细胞分为空白对照组、无义寡核苷酸阴性对照组（ad-HIF shRNA-neg）、ad-HIF shRNA干扰组、低氧培养组。

蛋白质免疫印迹试验Western blot技术检测转染病毒后HNEC中HIF-1α、VEGF、TGF-β1、bFGF的蛋白的表达情况；RT-PCR（Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction）HIF-1α、VEGF、TGF-β1、bFGF的mRNA的表达情况。结果转染ad-HIF shRNA-neg前后,HIF-1α、VEGF、TGF-β1、bFGF的蛋白差异（q1=1.3167;q2=0.7513;q3=0.3251;q4=0.6592）及其mRNA差异（q1=2.3514;q2=37.0480;q3=17.1131;q4=1.0917）均无统计学意义（p>0.05）。

与阴性对照组及空白对照组相比,转染ad-HIF shRNA后,]BF-1α表达蛋白下降40%（q=31.4690）,mRNA表达下降39%（q=16.5900）,差异均有统计学意义（p<0.05）；同时VEGF.TGF-β1、bFGF的蛋白及mRNA表达也随之下降,蛋白差异（q1=19.1571；q2=33.8090；q3=45.8940）及mRNA差异（q1=22.3920；q2=17.8800;q3=11.5991）均有统计学意义（p<0.05）；

与阴性对照组及空白对照组相比,低氧培养HNEC,其HIF-1α表达蛋白升高50%（q=32.3540）,mRNA表达升高46%（q=15.4570）差异均有统计学意义（p<0.05）；

同时VEGF.TGF-β1、bFGF的蛋白及mRNA表达也随之升高,蛋白差异（q1=20.2410;q2=35.2010;q3=47.3150）及mRNA差异（q1=21.4713；q2=18.3710；q3=10.3651）均有统计学意义（p<0.05）。

参考文献

[1]Mitochondrial metabolic remodeling in response to genetic and environmental perturbations[J].Kate E.R.Hollinshead,Daniel A.Tennant.Wiley Interdisciplinary Reviews:Systems Biology.2016(4)

[2]House dust mite extract induces growth factor expression in nasal mucosa by activating the PI3K/Akt/HIF-1αpathway[J].Xi Chen,Ying-Ying Li,Wei-Qiang Zhang,Wei-Ming Zhang,Han Zhou.Biochemical and Biophysical Research Communicatio.2015

[3]Oxymatrine suppresses proliferation and induces apoptosis of hemangioma cells through inhibition of HIF-1a signaling[J].Z-W Fei,M-K Qiu,X-Q Qi,Y-X Dai,S-Q Wang,Z-W Quan,Y-B Liu,J-M Ou.International Journal of Immunopathology and Phar.2015(2)

[4]Circulating factors are involved in hypoxia-induced hepcidin suppression[J].Giulia Ravasi,Sara Pelucchi,Federico Greni,Raffaella Mariani,Andrea Giuliano,Gianfranco Parati,Laura Silvestri,Alberto Piperno.Blood Cells,Molecules and Diseases.2014(4)

[5]李盈盈.调控HIF-1α对鼻黏膜上皮细胞生长因子表达的影响[D].南京医科大学,2016.