HEL人红白细胞白血病细胞的应用

背景^[1-3]

HEL人红白细胞白血病细胞是一株淋巴母细胞样细胞株，源自一位30岁白人男性；该患者患有恶性红细胞白血病，能够自然产生并能诱导球蛋白合成。HEL细胞的EB病毒核抗原阴性，没有表面免疫球蛋白与细胞质免疫球蛋白。HEL细胞表达HLA抗原(HLA-A3、AW32、BW35)，β-2小球蛋白，一定比例的细胞还表达La抗原。HEL细胞提供了一种用于研究红细胞分化和球蛋白基因表达的模型，它类似于小鼠中的血友病。

HEL人红白细胞白血病细胞

红白血病是白血病中的一种。白血病是一种原因未明的造血组织恶性疾病，起源于造血干/祖细胞某一单株细胞的恶性变。致某一系的白血病细胞在骨髓和其它造血组织异常增殖，干扰和抑制正常的造血和免疫功能，并浸润全身各器官和组织，产生贫血、发热、感染、出血、肝脾淋巴结肿大等相应的临床表现，周围血中也有白细胞量和质的改变。急性白血病按国际FAB分类标准，分为急性淋巴细胞性白血病（ALL）及急性髓性白血病（AML）。

ALL按细胞形态又分为L1、L2、L3、三型，AML同样又分为粒细胞白血病未分化型（M1）、粒细胞白血病分化型（M2）、颗粒增多的早幼粒细胞白血病（M3）、粒单核细胞白血病（M4）、单核细胞白血病（M5）、红白血病（M6）及巨核细胞白血病（M7）。在骨髓象中可见红细胞系显著增生，幼红细胞往往大于50%，且伴有形态异常，表现为巨幼样变、多核、巨形核、母子核、核碎裂等。同时有白细胞系的异常增生，原粒细胞(原、幼单核细胞)大于30%(NEC)，如外周血中原粒细胞(原、幼单核细胞)大于5%时，骨髓中原粒细胞(原、幼单核细胞)大于20%(NEC)。

应用^[4][5]

用于IFN-α2b对JAK2V617F阳性骨髓增殖性肿瘤COX-2及血管新生的影响研究

探讨IFN-α2b对HEL细胞是否存在抑制增殖、迁移,诱导凋亡以及抑制JAK2、COX-2基因表达的作用,并探讨其体外作用机制,为IFN-α2b应用于临床治疗骨髓增殖性肿瘤提供理论依据。方法:1收集接受荧光定量PCR检测确定有JAK2V617F阳性的MPN患者42例。其中原发性血小板增多症（ET）17例,真性红细胞增多症（PV）10例,原发性骨髓纤维化（PMF）15例;42例MPN患者按照治疗方案分为初治组25例,经IFN-α2b治疗组17例。

2治疗方案对照组:因ITP患者不存在JAK2V617F突变,且病理组织的p-JAK2、COX-2水平及MVD与正常人相同,故此次实验选用ITP患者作为对照组。初治组:初次确诊还未接受治疗的JAK2V617F突变的MPN患者治疗组:IFN-α2b治疗组所有MPN患者均应用接受IFN-α2b（与本次细胞实验中IFN-α2b同厂家不同批次）皮下或肌肉注射,300万单位/次,3-7次/周,至少应用治疗6个月以上,根据白细胞、血红蛋白及血小板数量来决定是否联合应用羟基脲。

3细胞实验分组选用jak2v617f突变阳性人红白血病细胞株（hel）。实验分为:对照组、ifn-α2b处理组。对照组仅用含10%新生牛血清的rpmi1640培养基培养。ifn-α2b处理组用含不同浓度ifn-α2b的10%新生牛血清rpmi1640培养基培养。ifn-α2b的终浓度分别为0.5×104u/l、1×104u/l、3×104u/l、5×104u/l。

4应用荧光定量聚合酶链反应（fq-pcr）检测mpn患者jak2v617f突变量。

5采用免疫组化检测患者骨髓病理组织p-jak2、cox-2的表达及cd105标记的微血管密度（mvd）。

参考文献

[1]Angiogenesis in myeloproliferative neoplasms,new markers and future directions[J].Michael Medinger,Jakob Passweg.memo-Magazine of European Medical Oncology.2015(4)

[2]VEGF in chronic myeloid leukemia treated with interferon and imatinib[J].Alvaro Aguayo.Leukemia Research.2014(6)

[3]Expression of 15?hydroxyprostaglandin dehydrogenase and cyclooxygenase?2in non?small cell lung cancer:Correlations with angiogenesis and prognosis[J].Ying Li,Suli Li,Dan Sun,Linlin Song,Xinmin Liu.Oncology Letters.2014(4)

[4]The Influence of Cox-2 and Bioactive Lipids on Hematological Cancers[J].Sesquile Ramon,Collynn F.Woeller,Richard P.Phipps.Current Angiogenesis.2013(2)

[5]赵亚玲.IFN-α2b对JAK2V617F阳性骨髓增殖性肿瘤COX-2及血管新生的影响[D].承德医学院,2016.