L6565小鼠白血病克隆细胞系的应用

背景^[1-3]

L6565小鼠白血病克隆细胞系源自L6565白血病小鼠的脾细胞胰悬液。染色体数从38到144不等。电镜观察证明L6565克隆细胞核边界清晰，细胞质中oragnalles和A类C类病毒颗粒丰富。c-myc和c-fos过量表达。L6565细胞克隆是一株含有RNA病毒的淋巴细胞白血病干细胞。

细胞克隆技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞，这是克隆技术必不可少的环节，而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来，所以可以说细胞克隆技术是生物技术中最核心、最基础的技术。

细胞克隆技术泛指所有体外培养，其含义是指从动物活体体内取出组织，于模拟体内生理环境等特定的体内条件下，进行孵育培养，使之生存并生长。细胞培养工作现已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域，成为最重要的基础科学之一。

L6565小鼠白血病克隆细胞

培养步骤：

复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟，弃去上清液，补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入6cm皿中），培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

应用^[4][5]

用于当归多糖硫酸酯抗艾滋病作用及其机制的研究

多糖硫酸酯的抗病毒作用,尤其是抗HIV-1的作用,越来越受到各国学者的广泛关注。当归是重要的补益类中药,以往的研究对当归多糖进行了硫酸酯化修饰,进一步的实验证明具有良好的免疫调节作用。

在小鼠AIDS模型上观察当归多糖硫酸酯（APS）的治疗作用,以及APS对AIDS治疗药物双汰芝（齐多夫定+拉米夫定）的增效减毒作用,以探讨APS及其与抗病毒药物联合用于AIDS治疗的可行性,同时对APS的作用机制作了初步的探索。方法:应用L6565小鼠白血病病毒（L6565 MuLV）,sc感染出生24 h内的乳鼠,观察4周后建立小鼠AIDS模型;造模成功后动物分别给予APS（ip）或/和双汰芝（ig）,每天1次,连续30 d。抗病毒作用检测如下:以RT-PCR法测定血浆病毒载量并以光密度扫描对PCR产物的电泳条带进行定量分析;流式细胞术测定外周血

参考文献

[1]Premature Termination of Reprogramming In Vivo Leads to Cancer Development through Altered Epigenetic Regulation[J].Kotaro Ohnishi,Katsunori Semi,Takuya Yamamoto,Masahito Shimizu,Akito Tanaka,Kanae Mitsunaga,Keisuke Okita,Kenji Osafune,Yuko Arioka,Toshiyuki Maeda,Hidenobu Soejima,Hisataka Moriwaki,Shinya Yamanaka,Knut Woltjen,Yasuhiro Yamada.Cell.2014(4)

[2]Overexpression of MIR9 indicates poor prognosis in acute lymphoblastic leukemia[J].Fusako Sugita,Kazuhiro Maki,Yuka Nakamura,Ko Sasaki,Kinuko Mitani.Leukemia&Lymphoma.2014(1)

[3]Colorectal cancer statistics,2014[J].Rebecca Siegel,Carol DeSantis,Ahmedin Jemal.CA A Cancer Journal for Clinicians.2014(2)

[4]miR-9 is an essential oncogenic microRNA specifically overexpressed in mixed lineage leukemia–rearranged leukemia[J].Ping Chen,Colles Price,Zejuan Li,Yuanyuan Li,Donglin Cao,Anissa Wiley,Chunjiang He,Sandeep Gurbuxani,Rejani B.Kunjamma,Hao Huang,Xi Jiang,Stephen Arnovitz,Mengyi Xu,Gia-Ming Hong,Abdel G.Elkahloun,Mary Beth Neilly,Mark Wunderlich,Richard A.Larson,Michelle M.Le Beau,James C.Mulloy,Paul P.Liu,Janet D.Rowley,Jianjun Chen.Proceedings of the National Academy of Sciences.2013(28)

[5]贾敏.当归多糖硫酸酯抗艾滋病作用及其机制的研究[D].第四军医大学,2005.