小鼠醛固醇(ALDOSTERONE)ELISA试剂盒的应用

背景^[1-3]

小鼠醛固醇(ALDOSTERONE)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）检测样品中小鼠醛固醇的水平。

往预先包被小鼠醛固醇（aldosterone）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠醛固醇（aldosterone）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

小鼠醛固醇(ALDOSTERONE)ELISA试剂盒

操作步骤：

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

3.样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

应用^[4][5]

用于高温高湿环境下一次性有氧运动对摔跤运动员减体重生理生化指标的影响研究

研究对象运动员8名。先分别测试受试者在高温高湿（33℃，60%）和常温常湿（23℃，40%）环境下的摄氧量，后让受试者在上述两环境下进行65%VO2max的跑台运动50min，测试并比较其运动前和运动后即刻体成分（体重、脂肪比例、水分总含量、去脂体重和肌肉量）、血液指标（血乳酸、身体激素、血清离子）、上臂力量{峰值力矩（PT）、相对峰值力矩（P—T/B）、对抗肌比值（A/A—R）、平均功率（AP）和疲劳指数（WF）}、运动后热环境主观感觉量表和体力感觉量表（RPE）的变化，并监测受试者的能量代谢（运动后即刻、运动后2h和次日晨）。上述四次实验每次间隔一周。

指标测定方法：仪器测定法（体成分、摄氧量、心率、力量、能量代谢、血乳酸、血清离子）、酶联免疫法（瘦素、脂联素、醛固醇、抗利尿激素和内脂素）、发光免疫测定（血清胰岛素、皮质醇、睾酮）。

研究结果：1、常温常湿和高温高湿环境下运动后，体成分相关指标（体重、脂肪比例、水分总含量、去脂体重、肌肉量）均低于运动前。高温高湿下运动后，体重和脂肪比例下降的幅度较大。

2、常温常湿和高温高湿环境下运动后，血清中Na+均高于运动前；Fe3+,Mg2+均低于运动前。常温常湿下运动后Na+和Ga2+低于运动前，Cl-高于运动前。高温高湿下运动后K+、Ga2+,高于运动前，Cl-低于运动前。除Ga2+离子外，其余血清离子常温常湿下运动后变化较大【其中Na+、Cl-两者差异显著（P<0.05）】。

3、常温常湿和高温高湿环境下运动后，除醛固醇升高外，血清脂联素、抗利尿激素、瘦素、内脂素和胰岛素均下降。除醛固醇外，其余激素常温常湿下运动后的变化较大。

参考文献

[1]Effects of exercise on adiponectin and adiponectin receptor levels in rats[J].Q.Zeng,K.Isobe,L.Fu,N.Ohkoshi,H.Ohmori,K.Takekoshi,Y.Kawakami.Life Sciences.2006(5)

[2]Muscle-derived interleukin-6—A possible link between skeletal muscle,adipose tissue,liver,and brain[J].Bente Klarlund Pedersen,Mark Febbraio.Brain Behavior and Immunity.2005(5)

[3]Adiponectin Responses to Continuous and Progressively Intense Intermittent Exercise[J].ROBERT R.KRAEMER,KARAM S.ABOUDEHEN,ANN K.CARRUTH,ROBERT J.DURAND,EDMUND O.ACEVEDO,EDWARD P.HEBERT,LISA G.JOHNSON,V.DANIEL CASTRACANE.Medicine&Science in Sports&Exercise.2003(8)

[4]Leptin and Exercise[J].Robert R.Kraemer,Hongnan Chu,V.Daniel Castracane.Experimental Biology and Medicine.2002(9)

[5]李然.高温高湿环境下一次性有氧运动对摔跤运动员减体重生理生化指标的影响[D].苏州大学,2014.