人白细胞介素17F(IL-17F)ELISA KIT的应用

背景^[1-3]

人白细胞介素17F(IL-17F)ELISA KIT盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。

将抗人IL-17F单克隆抗体包被在酶标板上；分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本，标准品和样本中的人IL-17F会与酶标板上的包被抗体充分结合；洗板后加入生物素化抗人IL-17F抗体，该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的人IL-17F发生特异性结合；

洗板后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合；洗板后加入显色剂底物TMB，若反应孔中样品存在不同浓度的人IL-17F，则HRP会使无色TMB变成不同深浅（正相关）的蓝色物质，加入终止液后反应孔会变成黄色；

最后，在λmax=450 nm（OD=450 nm）处测定反应孔样品吸光度（OD），样本中的人IL-17F浓度与OD成正比，通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中人IL-17F的浓度。

ELISA KIT产品图

白细胞介素17F(IL-17F)和IL-17A是IL-17家族中紧密相关的两个成员，有大约50%氨基酸同源。IL-17F来源于不同细胞类型，如Th17细胞、肥大细胞和嗜碱性粒细胞，在组织中广泛表达，包括肺。

IL-17F可诱导支气管上皮细胞、血管内皮细胞、成纤维细胞和嗜酸性粒细胞中的许多细胞因子、趋化因子和粘附分子。IL-17F利用IL-17RA和IL-17RC作为其受体，激活MAP激酶相关通路。

小鼠气道IL-17F基因的过表达与气道中的中性粒细胞增多、多种细胞因子的诱导、气道高反应性和粘液高分泌增加有关。因此，IL-17F在过敏性气道炎症中可能起到重要作用，对哮喘有重要的治疗意义。

应用^[4][5]

用于雾化吸入灭活草分枝杆菌对哮喘小鼠模型白细胞介素-17F表达的影响研究

探讨雾化吸入灭活草分枝杆菌治疗哮喘小鼠模型中白细胞介素-17F（IL-17F）表达对气道炎症和气道高反应性（AHR）的影响。

方法将24只雄性BALB/c小鼠，采用数字随机表法分为3组，每组8只：分别为对照组、模型组、治疗组。建立鸡卵清蛋白（OVA）致敏的哮喘小鼠模型。在实验的第1、8、15天，予模型组和治疗组每只小鼠腹腔注射混合25μg OVA和1mg氢氧化铝粉的PBS悬浊液0.2ml致敏；

第22至28天，将OVA致敏的小鼠至于密闭雾化箱内，予2%的OVAPBS悬浊液经雾化器雾化吸入激发30min，每天1次。第29-33天，治疗组继续予灭活草分枝杆菌溶液雾化吸入干预30min。

对照组则予PBS替代OVA溶液腹腔注射及雾化吸入刺激。雾化过程中观察小鼠形态、活动变化等情况，每组均在最后一次雾化结束后立即行有创气道阻力检测；收集支气管肺泡灌洗液（BALF），统计其炎症细胞数及细胞分类比例；

取肺组织行HE、过碘酸雪夫（PAS）染色，光镜下观察气道结构及病理改变，并行病理半定量评分，判断气道炎症严重程度；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测BALF和血清中IL-17F浓度；

采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）的标准曲线法，测定小鼠肺组织中IL-17F表达变化情况。使用SPSS16.0统计软件进行统计学分析。

参考文献

[1]Effect of inhaled inactivated Mycobacterium phlei in children with moderate asthma[J].Moyu Ming,Chaoqian Li,Zhixi Luo,Shengqiu Lv.Immunotherapy.2013(2)

[2]Therapeutic effects of inhaled inactivated Mycobacterium phlei in adult patients with moderate persistent asthma[J].Jinghong Zhang,Sujuan Guo,Chaoqian Li,Xiaohong Jiang.Immunotherapy.2012(4)

[3]PS1-015.IL-17F,rather than IL-17A promotes CD4+T cell activation and Th1-type immunity[J].Ce Tang,Shigeru Kakuta,Motohiko Kadoki,Yoichiro Iwakura.Cytokine.2011(1)

[4]Remodeling in asthma[J].Saleh Al-Muhsen,Jill R.Johnson,Qutayba Hamid.The Journal of Allergy and Clinical Immunology.2011(3)

[5]罗智熹.雾化吸入灭活草分枝杆菌对哮喘小鼠模型白细胞介素-17F表达的影响[D].广西医科大学,2014.