三苄糖苷的模拟移动床拆分方法

背景技术

三苄糖苷(Tribenoside，TBS)，即乙基-3，5，6-三苄氧基-D-呋喃葡萄糖苷，由两种光学异构体α体(α-乙基-3，5，6-三苄氧基-D-呋喃葡萄糖苷)和β体(β-乙基-3，5，6-三苄氧基-D-呋喃葡萄糖苷)组成的混合物。它具有抗炎、抗毒素、增强毛细血管韧力、保护创伤组织并促使其愈合的作用及较弱的镇痛作用，与神经鞘氨醇合用可预防性地对抗革兰氏阴性及阳性菌。该药于上世纪50年代发现并合成，于1999年由日本首先开发为治疗痔疮的口服药物，由于其具有极强的脂溶性，易于被小肠吸收，药物利用率较高，故其临床疗效较其它同类药物有很大提高。国内迄今尚未见到对TBS分离纯化的研究报道。通常可以采用传统低压层析的方法制备得到TBS产品，但是工艺技术耗时长，生产量也受到限制，同时纯度不高。

发明内容

本发明的目的在于针对目前在制备三苄糖苷异构单体的过程中所存在的时间长以及纯度不高的问题，提供一种采用模拟移动床制备高纯度三苄糖苷异构单体的新方法，该方法包括以下步骤:

a.三卞糖苷用甲醇溶解，浓度为O~100g/ml，一般将三苄糖苷配置成饱和溶液，具体实施时，可根据实际溶解效果进行调整；

b.用模拟移动床拆分三苄糖苷粗品；

c.浓缩、重结晶得到高纯度的两种三苄糖苷异构单体。

本发明的有益效果是可直接采用合成后的三苄糖苷粗品来制备三苄糖苷异构单体，不需要大量的前处理过程，简单、易控制，工艺技术简化，适用于大规模制备。高效液相色谱测定中，总杂质峰小于0.5%，单一杂质峰不超过0.2%，完全可用于药物的开发。

具体实施方式

1、设备及条件选择

采用模拟移动床色谱系统，该系统包括洗脱泵、进样泵、萃取泵、色谱柱、电磁阀、单向阀、控温器和PLC系统控制器及计算机组成。样品溶液和洗脱液分别从样品液入口和洗脱液入口注入系统，三卞糖苷的两个异构体分别从提余液和提取液两个出口中流出，每隔一定的时间样品液和洗脱液入口，提取液和提余液出口沿流动相流动的方向切换至下一支色谱柱。

2、色谱柱填料及流动相(溶剂)选择

填料纤维素-三(3，5_ 二甲基苯基氨基甲酸酯)涂覆型手性固定相，采用公知的方法(Okamoto Y , Kawashima M , Hatada K J.Chromatogr.1986，363:173~186)制备，填料粒度为f 150um，微粒越小，粒径分布越窄，越有利于分离；但粒径越小系统压力越大，最适宜的粒径范围是2(T40um。流动相(溶剂)为甲醇。

3、分离步骤

A、样品由进样泵注入色谱系统，进样浓度的增加有利于提高产量，但其浓度受三卞糖苷溶解度的限制，色谱系统由4~24根制备柱组成，分为4个区，色谱柱数目越多分离越好，但系统的复杂度及系统压力越高，最适合的是8~12根，通过模拟移动床色谱系统的控制器，定期控制电磁阀的开闭，使进样口、萃取液出口及残余液出口沿流动相的方向定期变换，使三卞糖苷的两个异构体从提取液和提余液两个出口流出系统；

B、得到的产品溶液，经过浓缩、重结晶，得到纯度在98%以上的合格产品；

C、成品检验 流动相:甲醇 流速:0.8ml/min.