RA大鼠星形胶质细胞的应用

背景^[1-3]

RA大鼠星形胶质细胞提取于新生2天大鼠大脑皮层，通过对GFAP的免疫荧光染色验证，经测试不含有支原体、细菌、酵母和真菌。

星形胶质细胞（Astroglia），是哺乳动物脑内分布最广泛的一类细胞，也是胶质细胞中体积的一种。用经典的金属浸镀技术（银染色）显示此类胶质细胞呈星形，从胞体发出许多长而分支的突起，伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间，起支持和分隔神经细胞的作用。

星星形胶质细胞是胶质细胞中胞体的，直径3-5微米，核呈圆球形常位于中央，用经典的银染色法显示此类胶质细胞呈星形。星形胶质细胞从胞体发出许多长而分支的突起，伸展充填在神经细胞的胞体及其突起之间，起支持和分隔神经细胞的作用。

细胞突起的末端常膨大形成脚板（footplate）或终足（endfoot），有些脚板贴附在邻近的毛细血管壁上，因此这些脚板又被称为血管足或血管周足;某些星形细胞突起还附着在脑脊髓软膜和室管膜的下膜上，把软膜、室管膜与神经元分隔开。

相邻的星形胶质细胞之间通过缝隙连接相互联系，使细胞形成同步活动电镜下星形胶质细胞中游离核糖核蛋白体和粗面内质网均很少，糖原颗粒丰富，有大量的称为胶质丝（glial filament）的原纤维。

大量研究表明星形胶质细胞是中枢神经系统中功能多样性细胞群中的一员。体外培养的星形胶质细胞是研究星形胶质细胞特性的有效工具。

应用^[4][5]

用于Orexin-A对培养大鼠星形胶质细胞迁移的影响及机制研究

Orexins即食欲素,是一对兴奋性神经肽激素的合称,于1998年在大鼠脑内发现。以往其研究主要集中在食欲调节、睡眠觉醒以及能量代谢等功能性方面。讨论Orexin-A对培养大鼠星形胶质细胞迁移的影响。

方法：用创伤愈合模型研究Orexin-A对培养大鼠原代星形胶质细胞迁移的作用,用免疫荧光方法鉴定星形胶质细胞上Orexin受体的表达和分布。结果：分别给予3nM,10nM,以及100nM的orexin-A,在作用0h、24h、48h通过共聚焦观察细胞迁移状态,发现orexin-A呈浓度时间依赖性的促进原代培养星形胶质细胞的迁移,其中orexin-A浓度为10nM,作用24h时,促进作用最为明显。

进一步通过细胞免疫荧光方法检测了Orexin-A两种受体OX1R和OX2R在星形胶质细胞的表达。免疫荧光结果显示OXlR和OX2R在大鼠培养的星形胶质细胞大量表达。OXlR在胞浆和胞核均有表达,OX2R则只在胞浆表达,胞核分布很少。给予OX1R和OX2R抑制剂SB334867和TCS OX229预处理后,OXlR特异性拮抗剂SB334867能够显著抑制orexin-A诱导的星形胶质细胞迁移,OX2R受体抑制剂TCS OX229则不起作用。

结论：orexin-A显著促进大鼠原代培养星形胶质细胞迁移,该作用是通过OX1R而非OX2R介导。

参考文献

[1]Blockade of central orexin 2 receptors reduces arterial pressure in spontaneously hypertensive rats[J].Yen‐Hsien Lee,Yu‐Wen E.Dai,Shang‐Cheng Huang,Tzu‐Ling Li,Ling‐Ling Hwang.Experimental Physiology.2013(7)

[2]Role of Orexin in the Pathophysiology of Depression:Potential for Pharmacological Intervention[J].Mathieu Nollet,Samuel Leman.CNS Drugs.2013(6)

[3]Interactions between VTA orexin and glutamate in cue-induced reinstatement of cocaine seeking in rats[J].Stephen V.Mahler,Rachel J.Smith,Gary Aston-Jones.Psychopharmacology.2013(4)

[4]Intravenous prenatal nicotine exposure increases orexin expression in the lateral hypothalamus and orexin innervation of the ventral tegmental area in adult male rats[J].Amanda J.Morgan,Steven B.Harrod,Ryan T.Lacy,Emily M.Stanley,Jim R.Fadel.Drug and Alcohol Dependence.2013

[5]舒庆.Orexin-A对培养大鼠星形胶质细胞迁移的影响及机制[D].华中科技大学,2013.