舍莫瑞林的固相合成方法

背景及概述^[1]

舍莫瑞林是一种生长激素释放因子(GRF)衍生物，其与相应的未修饰的(或天然的)GRF肽序列比较有延长的体内半衰期。除了促进生长激素的内源性产生或释放，该类GRF衍生物可能在GRF肽“主链”内的一个或多个位点掺入氨基酸取代，或者为GRF种的变体，其中C-末端和/或N-末端通过添加一个或多个碱性残基而被改变，或者被修饰以掺入肽化学领域传统使用的封闭基团类型从而保护肽末端免于体内不需要的生化攻击和降解。

制备^[1]

步骤1：固相肽的合成以100μmol量级进行。下列保护的氨基酸按添加到树脂上：Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Ile-OH、Fmoc-Asp(tBu)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Val-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-Tyr(tBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Phe-OH、Fmoc-IIe-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Asp(tBu)-OH、Fmoc-Ala-OH、Boc-Tyr(tBu)-OH。它们溶解到N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，并且根据顺序，利用O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)激活。Fmoc保护基团的移去利用20％(V/V)哌啶的N，N-二甲基甲酰胺(DMF)溶液20分钟(步骤1)来完成。最终的氨基酸的氨基利用O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸盐(HBTU)和二异丙基乙胺(DIEA)激活的乙酸而乙酰化。

步骤2：利用85％TFA/5％TIS/5％苯硫基甲烷和5％苯酚从树脂上切割肽，然后用干冰冷的(0-4℃)Et₂O进行沉降。粗肽收集在聚丙烯烧结的漏斗内，干燥，并重新溶解在40％乙腈的水(0.1％TFA)混合物中，然后冷冻干燥产生相应粗提物，用于纯化过程中。

参考文献

[1][中国发明]CN02804497.5长效生长激素释放因子衍生物