苏木素伊红染色液试剂盒的应用

背景^[1-3]

苏木素伊红染色液试剂盒综合了多种经典的HE染色方法，例如Harris法、Mayer法等，简化了操作步骤，缩短了操作时间，并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。可以用于组织切片或培养细胞的染色。

苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。

伊红(eosin)是一种化学合成的酸性染料，在水中解离成带负电荷的阴离子，可以和蛋白质氨基上带正电荷的阳离子结合，从而使细胞胞浆染成不同程度的红色或粉红色，与苏木素染色液染色形成的蓝色细胞核形成鲜明对比，从而使苏木素伊红(HE)染色成为病理组织切片中最广泛使用的一种常规染色方法。

苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。

应用^[4][5]

用于整块组织苏木精—伊红染色制片法与传统切片片染制作法比较的研究

传统石蜡组织切片片染制作法有一些弊端和局限性,如每次制作的数量少、制作周期长、耗费制作者较多的时间和精力,不适宜大批量教学切片制作需要。整块组织H.E染色切片制作法是近年来新出现的一种制片方法。

通过实验,利用自行配制的染液,即苏木素染色剂15mg、蒸馏水40mL、钾明矾600mg、碘酸钠5mg配制成苏木素染液；伊红染液用伊红R或B250mg、95%酒精50mL、蒸馏水50mL、冰醋酸少许配制成伊红染液,然后经过固定、浸洗、染苏木素液、浸洗分色、蓝化、梯度浓度酒精脱水、染复制伊红、盐酸酒精分色、纯酒精脱水、二甲苯透明、石蜡组织包埋、切片等一系列过程制作切片。此法制成的切片染色效果更加均匀,色彩更加亮丽。

通过实验发现整块组织制作的切片染色效果在有些方面要优于传统制作法,且在制作程序上大大简化,可以为制作者节省大量的时间及精力,对大批量教学科研石蜡组织切片的制作较为适宜,适合于大批量平行制作。

参考文献

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[5]蒙兆年.整块组织苏木精—伊红染色制片法与传统切片片染制作法比较的研究[D].兰州大学,2014.