鼠李糖—硅烷醇预防真皮表皮结合部老化

真皮表皮结合部（DEJ）是一个复杂的结构，对维持皮肤结构性和机械性起到至关重要作用。内在和外在老化与DEJ扁平化及其一些组成蛋白质的表达下降相关。这些变化参与到皮肤老化变脆和伤口愈合。L-鼠李糖是一种具有细胞促进和抗炎特性的天然单糖，它的作用目标是能被L-鼠李糖识别的凝集素表达细胞，如角质形成细胞和乳头状成纤维细胞。由于角质形成细胞和成纤维细胞参与到DEJ的形成，我们研究L-鼠李糖对DEJ组分表达的影响。L-鼠李糖的皮肤吸收非常差，我们将其接到甲基硅烷三醇（MTS），一种赋予细胞促进和结缔组织重组功效的载体分子。

L-鼠李糖以DEJ为目标

使用免疫荧光法测定四种DEJ重要组分的定位和表达：

—层粘连蛋白5（Laminin5）是由角质形成细胞生成的蛋白质，它结合基底角质细胞质膜和致密层（Lamina Densa）VII型胶原蛋白。单独L－鼠李糖对此蛋白无显著影响，而鼠李糖－硅烷醇（R-S）增强该蛋白表达（数据：1% R-S增加18%， 5%R-S 增加18%）。

—基底膜蛋白多糖（Perlecan）是一种存在于所有基底膜的普遍的硫酸乙酰肝素蛋白多糖（heparan sulfate proteoglycan），连接巢蛋白（nidogen）和IV型胶原蛋白。5%的R-S显著提高基底膜蛋白多糖的表达(+25%)。

—IV型胶原蛋白（IV Collagen），基底膜的最丰富的胶原糖蛋白之一，是致密层的重要组成成分。单独L-鼠李糖诱导适度的IV型胶原蛋白表达(+17%)，而相同浓度的R-S极大地增强了胶原IV表达(+64%)，在R-S低浓度（1%）时表达地增加已经非常明显(+41%)。

—VII型胶原蛋白（VII Collagen），一种位于致密层下方的大蛋白，被视为固定纤维（anchoring fibril）的主要成分，其灵活性是保持表皮-真皮结合力的必需。L-鼠李糖可以促进VII型胶原蛋白表达(25%)，而当与硅烷醇联合会协同增效这种促进作用(58%)。

之后，通过在人体外移皮肤进行的免疫荧光分析进一步证明，L-鼠李糖通过与MTS结合，生物利用性和功效都增强。在此实验中，L-鼠李糖没有明显效果。值得注意的是，单独MTS能够促进VII型胶原蛋白表达。R-S组合清晰地促进VII型胶原蛋白表达和迁移到DEJ，表明，MTS促进L-鼠李糖向负责合成VII型胶原蛋白（和许多其他DEJ成分）的真皮层成纤维细胞的传递。

鼠李糖硅烷醇在皮肤多层的作用

老化影响到所有皮肤层：表皮层变薄和再生能力下降，真皮层细胞外间质（ECM）下降并组织变差。我们因此测量其他参数，以证明R-S对表皮层和真皮层的功效：

—Ki67核蛋白，一种表皮细胞循环的标记蛋白。

—I型胶原蛋白，真皮层的主要胶原蛋白，其下降是衰老的标志。如前所示，R-S能够促进DEJ组分（IV型胶原蛋白，层粘连蛋白5）的表达。此外，我们发现R-S促进角质形成细胞增殖（Ki67）和真皮层I型胶原蛋白的表达。

超微结构分析

老化极大影响到DEJ蛋白表达，可以通过电子显微镜分析证实这些蛋白表达变化导致的结构变化。对比‘年轻’DEJ（39岁供体）和‘衰老’DEJ（68岁供体），强调出透明层（lamina lucida）组分的下降导致致密层减薄和密度减少。此外，我们可以观察到乳头真皮层细胞外间质的固定纤维表达显著下降。在衰老的人体外移皮肤上局部使用R-S纠正了所有这些参数，恢复到参考型。

总结：

使用L-鼠李糖衍生物R-S处理人体外移皮肤（50-70岁供体）增加一些DEJ重要蛋白（免疫荧光染色方法）表达，并提高DEJ超结构（电子显微镜方法）。此外，我们的实验表明，表皮屏障是鼠李糖应用的巨大障碍，MTS载体分子增强其生物利用性的办法极大提高这种糖的人体功效。