大鼠N端前脑钠素(NT-PROBNP)ELISA试剂盒的应用

背景^[1-3]

大鼠N端前脑钠素(NT-PROBNP)ELISA试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中N端前脑钠素（NT-proBNP）含量。

大鼠N端前脑钠素(NT-PROBNP)ELISA试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中N端前脑钠素(NT-proBNP)水平。

用纯化的N端前脑钠素(NT-proBNP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入N端前脑钠素(NT-proBNP)，再与HRP标记的N端前脑钠素(NT-proBNP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的N端前脑钠素(NT-proBNP)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中N端前脑钠素(NT-proBNP)浓度。

氨基末端脑钠肽前体（duN terminal pro B type natriuretic peptide,NT-proBNP）是目前最重要的心脏功能生物标志物。

血清标志物检测是临床上心衰早期诊断和预后判断的重要手段之一。其中利钠肽（一种神经内分泌系统激活标志物），包括脑尿钠肽（BNP）和氨基末端脑钠尿肽（NT-proBNP），是国内外（ECS/ACC/AHA/HFSA/CSC）心力衰竭指南均推荐的心力衰竭首选血清标志物推荐采用利钠肽识别心衰发病的高危人群，并对其进行全面管理和预防。

相比于BNP，NT-proBNP的半衰期更长、稳定性更好，因此NT-proBNP检测早期或轻度心衰的敏感性更高，血样送至实验室的时间更充分，更适用于临床应用。

应用^[4][5]

用于胰高血糖素样肽1对心肌重塑和心功能的保护作用及机制研究

胰高血糖素样肽1（GLP-1）是一种肠降血糖激素,体内半衰期较短,使用外源性GLP-1协同剂利拉鲁肽已广泛用于糖尿病人的治疗。近年来的研究结果表明,不依赖降血糖调节机制的利拉鲁肽疗法,也可用于高血压,心肌梗塞,心肌病和其它多种心血管疾病的治疗。

但有关GLP-1疗法对压力性负荷所致心力衰竭的疗效和作用机理,尚缺少足够的系统性评价和探索。因此,选择了大鼠腹主动脉缩窄在体心脏模型,观察了利拉鲁肽对由压力负荷增加所致AngII系统活化的干预特征。

1) 心肌氧化应激和抗氧化酶的作用;

2) AngII AT1/AT2受体平衡的调节;

3) 纤维细胞的迁移和增生的影响;

4) 心肌细胞肥大和心脏收缩和舒张功能的调节。

为了解调节的可能机制,实验进一步分析了利拉鲁肽疗效的作用环节。

1) 观察血液中GLP-1水平的变化;

2) 心脏形态和重量的作用;

3) 纤维化反应调节蛋白表达如mTOR/p70S6K的影响;

4) 自噬调节蛋白表达如LC3,Beclin-1,p62的影响;

5) 心肌纤维化和心功能改变的调节。

在培养的H9C2心肌细胞,观察了利拉鲁肽对AngⅡ诱导下心肌细胞反应特征的直接作用。

1) 细胞增殖和肥大的作用;

2) AngII受体表达的调节;细胞氧化反应水平如ROS和纤维化介导蛋白TGFβ1和α-SMA的调定;

3) 纤维化调节蛋白如mTOR,p-mTOR,p70S6K,p-p70S6K表达的影响;

4) 胶原蛋白表达变化的作用。

在上述研究中,为澄清利拉鲁肽调定AngII受体和纤维化的传导机制,实验采用AngII AT1受体阻断剂替米沙坦和mTOR特异性抑制剂雷帕霉素进行了对比性观察,证实了利拉鲁肽受体通路和氧化应激的直接细胞效应。

参考文献

[1]Acute AT 1 R blockade prevents isoproterenol-induced injury in mdx hearts[J].Tatyana A.Meyers,Jackie A.Heitzman,Aimee Krebsbach,Lauren M.Aufdembrink,Robert Hughes,Alessandro Bartolomucci,DeWayne Townsend.Journal of Molecular and Cellular Cardiology.2019

[2]GLP-1 receptor agonists and cardiovascular outcome trials:An update[J].Eirini Andrikou,Costas Tsioufis,Ioannis Andrikou,Ioannis Leontsinis,Dimitrios Tousoulis,Nikolaos Papanas.Hellenic Journal of Cardiology.2018

[3]Recent updates on GLP-1 agonists:Current advancements&challenges[J].Dilip Sharma,Suril Verma,Shivani Vaidya,Kiran Kalia,Vinod Tiwari.Biomedicine&Pharmacotherapy.2018

[4]Curcumin protects against diabetic cardiomyopathy by promoting autophagy and alleviating apoptosis[J].Qing Yao,Zhi-qiang Ke,Shuang Guo,Xiao-song Yang,Fei-xue Zhang,Xiu-fen Liu,Xiao Chen,Hong-guang Chen,Huan-ya Ke,Chao Liu.Journal of Molecular and Cellular Cardiology.2018

[5]郑荣华.胰高血糖素样肽1对心肌重塑和心功能的保护作用及机制研究[D].山西医科大学,2020.