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四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)的原理和使用方法

发布日期:2020/10/28 9:38:03

背景及概述[1]

四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)可用于沙门氏菌选择性增菌培养。培养基配方(每升):蛋白胨9g;牛肉膏粉4.5g;氯化钠2.7g;碳酸钙40.5g;无水硫代硫酸钠31.9g;牛胆盐5g;最终pH7.0±0.2。

原理[1]

蛋白胨和牛肉膏粉提供碳源、氮源和维生素满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌(四硫磺酸钠是在培养基加入碘和碘化钾时形成),而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖;胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其它革兰氏阳性细菌。

使用方法[1]

1、称取本品93.6g,加入蒸馏水或去离子水1L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装于三角瓶中,每瓶100mL。

2、将三角瓶放入灭菌锅中,121℃高压灭菌20min,冷至30℃,每100mL基础培养基中加入四硫磺酸钠煌绿增菌液配套试剂(SR0040)2支配成四硫磺酸钠煌绿增菌液或再添加2支新生霉素(SR0030)配成MKTTn肉汤,混合均匀。

3、在无菌环境中,移取增菌液1mL转种于10mlTTB/MKTTn中或移取前增菌液25ml转种于225mlTTB中。

4、将已接种的试管放入恒温培养箱中,42℃培养18-24h。

5、观察结果。

参考文献

[1]四硫磺酸盐煌绿增菌液基础(TTB)产品介绍

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